细胞制备操作规程

细胞制备操作规程

洁净区消毒操作规程

1 日常消毒

1.1 洁净区紫外消毒

1.1.1 按照《KG316系列微电脑时控开关说明书》设置定时开关，设置每天早上7:00-7:30开启操作室的紫外灯进行消毒30min。

1.1.2 消毒结束后，为消除紫外消毒过程产生的臭氧，至少开启空调系统通风15分钟后方可进入洁净室操作。

1.1.3 检查确认紫外灯运行情况，并填写消毒记录表，每月统计紫外灯使用时间。

1.2进入洁净操作室后，在操作前用75%的酒精对生物安全柜进行全面擦拭消毒。

1.3每次实验操作完毕后，整理实验器具，用75%的酒精擦拭工作台面及传递柜（传递柜在洁净室方向擦拭），最后按《ESCO生物安全柜标准操作程序》开启生物安全柜内紫外灯进行消毒30min以上。

2 定期臭氧消毒

2.1 载体实验区臭氧消毒

2.1.1 在载体实验区空调系统已关闭的状态下，关闭直排系统开关，空调系统切换至“变频”状态。

2.1.2 然后按载体实验区空调系统控制面板上“电源”按钮，指示灯亮（红色）。

2.1.3 再按载体实验区空调系统控制面板“功能”按钮，使空调切换至“送风”状态，送风指示灯亮。

2.1.4 设定变频器频率为30Hz，按变频器控制面板上的“RUN”按钮，指示灯亮（绿色），变频器频率逐渐上升，直至设定值后稳定。这时空调风机同步运行。（第一次运行时设置变频器频率，以后运行无需再次设定。）

2.1.5 打开载体实验区臭氧发生器电源开关，再按一下载体实验区臭氧启动开关。载体实验区臭氧发生器开始工作。

2.1.6 在实验室进出大门，挂“正在消毒”标志。人员迅速撤离消毒区域。

2.1.7 待臭氧发生器工作时间到达设定时间（180分钟）后，自动停机。

2.1.8 按变频器控制面板上的“STOP”按钮，指示灯亮（红色），频率逐步下降至0，空调风机同步关闭。（注：若为晚上下班后进行的臭氧消毒的，可在保持空调继续运行至第二天上班后开始操作。）

2.1.9 关闭载体实验区臭氧发生器电源开关，然后再按载体实验区空调系统控制面板上“电源”按钮，指示灯灭，彻底关闭空调系统。

2.1.10 打开直排系统开关，空调系统切换至“定频”状态。

2.1.11 正常开启空调系统，排风30分钟后臭氧消除至安全浓度以下后，撤去“正在消毒”标志，进入实验室正常实验。

2.1.12 填写臭氧消毒记录。

2.2 细胞制备区臭氧消毒

2.2.1 正常按《空调系统标准操作程序》开启空调系统。

2.2.2 打开细胞制备区臭氧发生器电源开关，再按一下细胞制备区臭氧启动开关。细胞制备区臭氧发生器开始工作。

2.2.3 在实验室进出大门，挂“正在消毒”标志。人员迅速撤离消毒区域。

2.2.4 待臭氧发生器工作时间到达设定时间（180分钟）后，自动停机。关闭细胞制备区臭氧发生器电源开关。

2.2.5 保持空调继续运行约2小时，等臭氧浓度消除至安全浓度以下后，撤去“正在消毒”标识，正常进入实验室开展实验。若为晚上下班后消毒，无需在消毒后立即进入细胞制备实验室的，可设置空调系统在消毒结束后定时关闭，在第二天上班后再开启空调自净30分钟，消除残留臭氧后进入。

2.2.6 填写臭氧消毒记录。

3. 注意事项

3.1 消毒前应确认所有实验室人员已全部撤离，方可开启臭氧。

3.2 打开臭氧发生器消毒前，先检查洁净区内温湿度。温度应不低于18℃，相对湿度不小于45%。若温度过低，应先开启空调使温度升高后再按上述操作，严禁在开启臭氧同时开启制热功能。