《中国医学创新》第１ｏ卷第１１期（总第２５７ ）２０１３年４月 医技与临床Ｙｉｊｉｙｕｌｉｎｃｈｕａｎｇ 特发性血小板减少性紫癜患者外周ｆｆｌｌＴｒｅｇ细胞 及相关细胞因子检测的临床意义 滑劲咏① 陈研② 【摘要】目的：检测特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）患者外周血中ＣＤ４ 、ＣＤ２５ 调节性Ｔ（Ｔｒｅｇ）细胞的比例及相关细胞因子水平的 变化，探讨其在ＩＴＰ发病中的作用。方法：依据临床诊断标准，检测２２例健康人、３５例初诊ＩＴＰ患者的外周血标本，流式细胞学方法检测 各组ＣＤ４ ＣＤ２５；ｈ， Ｔｒｅｇ细胞和ＣＤ４ ＣＤ２５ ＣＤ１２７ｄ。ｍＴｒｅｇ细胞的表达水平，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测Ｔｒｅｇ细胞分泌的细胞因子ＩＬ一 １０、ＩＬ一２、ＴＮＦ—ａ、ＩＦＮ一 的表达水平。结果：初诊ＩＴＰ患者ＣＤ４ ＣＤ２５ｈｉ￣Ｔｒｅｇ细胞、ＣＤ４ ＣＤ２５ ＣＤ１２７ｄｉｍＴｒｅｇ细胞比例明显低于正常 对照组（Ｐ＜０．Ｏ１），ＩＴＰ患者血清ＩＬ一２、ＴＮＦ—ｏ【及ＩＦＮ一 水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；血清ＩＬ一１Ｏ水平明显低于正常对照组 （Ｐ＜０．Ｏ１）。结论：调节性Ｔ（Ｔｒｅｇ）细胞表达异常是特发性血小板减少性紫癜发病机制的重要环节，对ＩＴＰ患者应定期观察其血液中ＩＬ、 ＴＮＦ—ｏ【和ＩＦＮ一 水平变化，以判断其病情变化、疗效观察。 【关键词】特发性血小板减少性紫癜； 调节性Ｔ细胞； 白细胞介素； 肿瘤坏死因子一 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４—４９８５．２０１３．１１．０４８ 特发性血小板减少性紫癜（ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｔｈｒｏｍｂｏｃｙ 室温避光反应１５ ｍｉｎ，加入５００ ｌ红细胞裂解液，溶解红 ｔｏｐｅｎｉｃｐｕｒｕｒａ，ＩＴＰ）是一种儿童及青年女性常见的免疫性血 细胞１５ ｍｉｎ。完全溶血用磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）洗涤，２００ ｇ 小板破坏过多造成的一组疾病。引发ＩＴＰ的原因涉及免疫、 离心５ ｍｉｎ后，５００ ｌ ＰＢＳ悬浮细胞，立即上流式细胞仪检 遗传、环境等多方面因素。近年来发现，调节性Ｔ细胞（ 测并记录。（２）ＩＴＰ患者组治疗前、治疗后及正常对照组于 Ｔｒｅｇ）能够维持外周免疫耐受，其数量减少和免疫抑制功能 清晨空腹抽静脉血３ ｍｌ，取血清置一２０℃保存。采用酶联免 减弱可能导致ＩＴＰ患者的免疫调节功能紊乱 ］。ＣＤ４、ＣＤ２５ 疫吸附法进行细胞因子ＩＬ一２、ＩＬ一１０、ＴＮＦ一 及ＩＦＮ一 检测。 和ＣＤ１２７联合标记可以准确鉴定Ｔｒｅｇ细胞，同时检测ＩＴＰ １．４统计学处理应用ＳＰＳＳ １３．０软件，检验两组数据符合 患者外周血中白细胞介素（ＩＬ）、肿瘤坏死因子一 （ｔｕｍｏｒ 正态分布且方差齐后采用ｔ检验，不符合则采用非参数检验， ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔ０卜 ，ＴＮＦ一０【）与 一干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－，／， 多组间均值比较采用单因素方差分析。Ｐ＜０．０５表示差异有 ＴＦＮ一 ）水平的变化，为研究ＩＴＰ的病因及临床治疗提供依 统计学意义。 据。 ２结果 １资料与方法 检测３５例ＩＴＰ初诊患者和２２例健康体检者的ＣＤ４￣ １．１一般资料选取２００９年７月一２０１１年８月郑州大学附 ＣＤ２５￣ｇｈＴ细胞和ＣＤ４￣ＣＤ２５ ＣＤ１２７￣Ｔ细胞表达水平，初诊 属郑州市中心医院与郑州大学第一附属医院门诊和住院治疗 ＩＴＰ患者ＣＤ４ ＣＤ２５￣ｅ．Ｔ细胞和ＣＤ４ ＣＤ２５ ＣＤ１２７ｄｉｍ Ｔ细胞 诊断明确的ＩＴＰ患者３５例（按照《血液病诊断及疗效标准》 占ＣＤ４ Ｔ细胞比例均低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），差异有 确诊【２】ｏ其中男１１例，女２４例，年龄１８～６３岁，平均３６．５ 统计学意义，．见表１。 岁；对照组为健康体检者２２例，各项指标正常，无感染性 表１ 初诊ＩＴＰ组与正常对照组ＣＤ４ ＣＤ２５ｈｉａ．－ｒ和 疾病、肿瘤、自身免疫性疾病等疾患，男ｌＯ例，女１２例， ＣＤ４￣ＣＤ２５ ＣＤ１２７ａｉｍＴ细胞的表达（ ±ｓ） ％ 年龄１７～６２岁，平均３５．２岁。 １．２试剂与抗体ＦＩＴ Ｃ标记鼠抗人ＣＤ４抗体、ＰＥ标记鼠 抗人ＣＤ２５抗体和ＰＥ—ｃｙ ５标记鼠抗人的ＣＤ１２７抗体（购自 ＢＤ公司）。仪器为流式细胞仪器购自美国ＢＤ公司，为临 床应用型号ＣＡＢＩＬＵＲ，荧光激发光的波长为４８８ ｎｍ，系统 分析软件为ＣＥＬＬＱＵＥＳＴ。血清ＩＬ一２、ＩＬ一１０、ＴＮＦ一 及 ＩＦＮ一 测定均采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），试剂盒 由上海晶美生物有限公司提供。测量仪器为佰腾ＥＬＸ８０８ ３５例ＩＴＰ初诊患者治疗前血清ＩＬ一２、ＴＮＦ一 及ＩＦＮ一 全自动酶标仪。 水平均明显高于治疗后及正常对照组（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．Ｏ１）； １．３方法（１）各取５０ ｌ抗凝血于流式专用管中，分别加 血清ＩＬ－ｌ０水平均明显低于治疗后及正常对照组（Ｐ＜０．Ｏ１）。 入５ ｌ ＣＤ４一ＦＩＴ Ｃ、ＰＥ—ＣＤ２５、ＰＥ—ｃｙ ５－ＣＤ１２７荧光标记抗体， 见表２。 ３讨伦 ①郑州大学附属郑州市中心医院河南郑州４５０００７ ＩＴＰ是一种自身免疫性疾病，因血小板免疫性破坏而引 ②郑州市第二人民医院 起外周血中血小板水平下降的出血性疾病。过去对ＩＴＰ的发 通讯作者：滑劲咏 病机制的研究主要认为是与感染，免疫因素，遗传及肝脾的 Ｍ￣ｌｉｅａｌ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ Ｖｏ１．１０。Ｎｏ．＂Ａｐｒ，２０１３ 一８５— 医技与Ｉ临Ｊ；｝三Ｙｉｊｉｙｕｌｉｎｃｈｕａｎｇ 《中国医学创新》第１０卷第１１期（总第２５７期）２０１３年４月 ５９例椎管内肿瘤的核磁共振分析 陈植荣① 【摘要】目的：探讨核磁共振对椎管内肿瘤的诊断效果。方法：搜集本院２００８年５月一２０１２年６月收治的５９例经手术病理证实的椎 管内肿瘤患者的病历资料，对核磁共振检查结果及手术病理诊断结果进行对比分析。结果：５９例患者经核磁共振定位诊断准确率为８８．１４％， 定性诊断准确率为７２．８８％。定位诊断率与定性诊断率相比，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论：核磁共振是目前对椎管内肿瘤进行检查的 最好方法，能有效的对其发病部位及性质进行诊断；诊断率主要取决于信号的强弱、强化特征。 【关键词】椎管内肿瘤； 核磁共振； 手术病理 ｄｏｉ：１０．３９６９６．ｉｓｓｎ．１６７４—４９８５．２０１３．１１．０４９ 核磁共振是目前对椎管内肿瘤进行诊断的最好方法，如 压力。２００８年５月一２０１２年６月本院共收治经核磁共振及 术后病理两种方式进行检查的患者５９例，结果如下。 １资料与方法 医师的技术成熟，其对椎管内肿瘤的定位诊断率能达９７％ 以上，定性诊断率也能达到７０％以上 。椎管内肿瘤是一类 特殊性的疾病，其早期症状轻、体征不典型，如缺乏有效的 １．１一般资料搜集本院２００８年５月一２０１２年６月收治的 检查方法，极容易造成误诊，给患者带去一定的精神及经济 ５９例经手术病理证实的椎管内肿瘤患者的病历资料。其中 男２９例，女２７例，年龄ｌ３ ６８岁，平均（４１．３±４．６）岁。 ①广东省潮州市中心医院广东通讯作者：陈植荣 潮州５２１０００ 其中以疼痛为首发症状的２３例；以感觉障碍为首发症状的 Ｐ＜Ｏ．０５，｝ ｜Ｐ＜０．０１，与正常对照组比较；＃与治疗后比较，Ｐ＜Ｏ．０５ 作用等因素相关，尤以免疫因素关系最为密切 。 ．由此可见，ＩＴＰ作为一种自身免疫性疾病，存在多种细 胞相关细胞因子的异常 ，临床上对ＩＴＰ患者定期观察其血 目前研究表明，调节性Ｔ淋巴细胞（Ｔｒｅｇ细胞）与ＩＴＰ 密切相关，其数量减少、免疫抑制功能的减弱可能是导致 ＩＴＰ患者免疫调节机制紊乱的一个重要机制。Ｔｒｅｇ细胞是 一液中ＩＬ一２、ＩＬ一４、ＩＬ一６、ＩＬ一１０、ＴＮＦ— 及ＩＦＮ一 等细胞 因子水平的变化，对于判断其病情的变化，治疗效果及其预 后具有重要意义。 个成熟的ＣＤ４ Ｔ细胞亚群，ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇ细胞对 细胞免疫和体液免疫反应均能抑制，主要是对致敏过程产 生的效应性Ｔ细胞有较强的免疫抑制作用，这种抑制作用 参考文献 ［１】ＬｉｕＢ，ＺｈａｏＨ，Ｐｏｏ ａＭＣ，ｅｔａ１．Ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｙ ｏｆＣＤ４ ＣＤ２５ ｒ ｅｇｕｌａ，ｔｏｒ Ｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｉｄｉｏ ｐａｔ ｈｉｅ ｔｈｒ ｏｍｂｏ ｃｙ ｔｏ ｐｅｎｉｃ ｉｄｉｏ ｐａ ｔｈｉｃ ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔ 随着ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇ细胞数量增加而增强，为维持体内 效应性Ｔ细胞和外周免疫耐受发挥重要作用。本实验检 测结果显示，初诊ＩＴＰ患者ＣＤ４ ＣＤ２５ 岫Ｔ细胞和ＣＤ４ ｏｐｅｎｉｃｐｕｒｐｕｒａ［Ｊ］．ＥｕｒＪＨａｅｍａｔｏｌ，２００７，７８（２）：１３９－１４３． ＣＤ２５ ＣＤ１２７ｄｉｍ Ｔ细胞占ＣＤ４ Ｔ细胞比例明显低于正常对 照人群，说明Ｔｒｅｇ细胞在维持外周免疫耐受中发挥重要作 用，其数量减少可能是ＩＴＰ发病的一个重要机制，差异具 有统计学意义。近年研究认为，炎性介质和细胞因子参与 ［２】张之南，沈悌．血液病诊断及疗效标准［Ｍ】．第２版．北京：科学 出版社，１９９９：２４５—２５０． ［３］陆再英，钟南山．内科学【Ｍ］．第７版．北京：人民卫生出版社， ２００８：６４８—６５１． 了ＩＴＰ的发病过程。本研究结果表明，ＩＴＰ患者血清ＩＬ一２、 ＴＮＦ一０【、ＩＦＮ一－ｙ水平明显增高（尸＜０．０１），而血清ＩＬ一１０ 水平明显降低（Ｐ＜０．Ｏ１）引起Ｔｈｌ型细胞反应，进一步诱 ［４】陈灏珠．实用内科学［Ｍ】．第１２版．北京：人民卫生出版社， ２００５：２４３６—２４４４． 【５］Ｇｕｏ Ｃ，Ｃｈｕ Ｘ，Ｓｈｉ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎ ｏｆＴｈ１－ｄｏｍｉｎａｎｔ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｐｒｏｆｉｌｅｓ ｂｙ ｈｉｇｈ－ｄｏｓｅ ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ ｉｎｐａｆｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ 导巨噬细胞激活，补体形成和细胞毒细胞活性增加，最终 导致巨核细胞及血小板的破坏。ＩＴＰ患者血清ＴＮＦ— 明显 ＪＣｌｉｎＩｒｍｎｕｎｏ］，２Ｏ０７，２７（６）：５５７—５６２． 升高（Ｐ＜０．０１），加剧了对机体的损伤，ＴＮＦ一０【的升高可 能与发病前的病毒或细菌感染有关。 一（收稿日期：２０１２—１１－２９）（本文编辑：车艳） ・ Ｍｅｄｉｃａｌ ＩｎｎｏｖａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａＶｏ１．１０，Ｎｏ．１１ Ａｐｒ．２０１３ ８６一
