一、名词解释
1、生物技术:也称生物工程,是人们以现代生命科学为基础,结合先进的工程
技术手段和其他基础科学的科学原理,按照预先的设计,改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。
2、基因组DNA文库:将某一种基因DNA用适当的酶切断后,与载体DNA重
组,再全部转化宿主细胞,得到含全部基因组DNA的种群,称为基因组DNA文库。
3、选择标记基因:是指该基因的表达产物对选择剂产生抗性,致使转化细胞不受选择剂影响,能正常生长、发育、分化,从而把转化体选择出来的一类基因。
4、基因和基因组 DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因(gene)。一个生物体的全部DNA序列称为基因组(genome)
5、载体:把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进
行繁殖或表达的工具称为载体。
6、cDNA文库:即由mRNA经过反转录成cDNA,然后来构建文库,构建的文库不包含内含子。
7、转化:外源DNA导入宿主细胞的过程称之为转化。
8、重叠基因:一个基因序列中,含有另一基因的部分或全部序列。
9、基因组文库:把某种生物基因组的全部遗传信息通过载体贮存在一个受体菌克隆子群体中,这个群体即为这种生物的基因组文库。
10、细胞工程:以生物细胞、组织或器官为研究对象,运用工程学原理,按照预定目标,改变生物性状,生产生物产品,为人类生产或生活服务的科学。 11、.外植体:指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。
12、愈伤组织:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在外植体切面上产生。
13、体细胞杂交:(原生质体融合)指在人工控制条件下不经过有性过程,两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。
14、悬浮培养:是将植物游离细胞或细小的细胞团,在液体培养基中进行培养的方法。
15、原生质体:指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。 16、传代:将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。 17、原代培养:也称初代培养期。从体内取出组织接种在培养瓶中培养到第一次传代前阶段,一般持续1-4周。
18、细胞系:经过再培养后而形成的具有增殖能力、特性专一、类型均匀的培养细胞。
19、细胞株:将所得到的纯净细胞群,以一定的密度接种在lmm厚的薄层固体培养基上,进行平板培养,使之形成细胞团,尽可能地使每个细胞团均来自一个单细胞,这种细胞团称为“细胞株”。
20、干细胞:干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,它可以化成多种功能细胞。
21、胚胎工程:在体外受精和体外早期胚胎发育的基础上,通过卵子切割、性别控制、嵌合作、细胞核移植、转基因操作等定向控制、改造和创造新遗传性状的技术统称为胚胎工程,又称发育工程。
22、代谢控制发酵:用人工诱变的方法,有意识地改变微生物的代谢途径,最大限度地积累产物,这种发酵称为代谢控制发酵。
23、菌种退化:指整个菌体在多次接种传代过程中逐渐造成菌种发酵力(如糖、氮的消耗)或繁殖力(如孢子的产生)下降或发酵产物得率降低的现象。 24、诱变育种是指用物理、化学因素诱导植物的遗传特性发生变异,再从变异群体中选择符合人们某种要求的单株,进而培育成新的品种或种质的育种方法。 25、基因的直接进化:在分子水平上,对目标基因直接处理,然后通过高通量的筛选方法,提高目标蛋白的性能。基因的直接进化,可使已有基因获得新的特性,可获得自然界中不存在的基因,可解决许多新的理论和应用问题。
26、酶工程:研究酶的生产和应用的技术过程,包括酶的制备、酶的固定化、酶分子修饰与改性和酶反应器等。
27、酶的改性:通过各种方法改进酶的的催化特性的技术。 29、抗体酶:一类具有催化功能的抗体分子。又叫催化性抗体。
30、酶分子修饰:通过各种方法是酶分子结构发生改变,从而改变酶的催化特性的技术。
31、固定化酶:固定在一定载体上并在一定空间范围发生催化反应的酶。 33、酶分子定向进化:模拟自然进化过程(随机突变和自然选择),在体外进行酶基因的人工随机突变,建立突变基因文库,在人工控制条件的特殊环境下,定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。
34、什么是蛋白质工程?
是以对蛋白质结构和功能关系的认识为依据,借助基因工程技术和X-射线衍射分析技术,从基因入手,通过定点突变改变核苷酸顺序,以达到改造现有蛋白质分子、或创造新的蛋白质分子目的的技术学科。
35、蛋白质结构域:是指蛋白质分子上可以区分出来的亚级球状结构,是高于超二级结构的结构层次。 36、定点突变:定点突变是对已知序列的基因(或DNA)中任意指定位置进行突变的技术。
其主要的技术过程包括核苷酸的置换、插入、或删除。
37、趋异进化:亲缘较近的生物分子,由于所处的环境不同,靠突变而使性能上表现某些差异的现象称为趋异进化。
38、趋同进化:亲缘关系较远的分子,由于所处的环境相同,靠进化而显示相似的形态与功能。这种现象称为趋同进化。 39、生物导弹:将生物毒蛋白与特定的抗体偶联起来,利用抗体的定向运输功能,将毒素定向运输到特定细胞上去起特定的作用。这种特殊的药物就是免疫毒素,也称为生物导弹。
40、蛋白组学:基因组编码的所有蛋白质,是研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的学科。
41、基因疫苗:将含有编码某种抗原蛋白的基因序列的质粒作为疫苗,直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导宿主产生对抗该抗原蛋白的免疫应答而达到免疫的目的。也叫DNA疫苗或核酸疫苗。 42、基因治疗:利用遗传学原理治疗人类疾病。
二、选择题
1. 蛋白质工程的实质是( )
A. 改变氨基酸结构 B. 改造蛋白质结构 C. 改变肽链结构 D. 改造基因结构 2. 基因工程的实质是( )
A. 基因重组 B. 基因突变 C. 产生新的蛋白质 D. 产生新的基因
3. 干扰素经过改造可长期储存,从蛋白质水平上应改变的是( )
A. 光氨酸 B. 精氨酸 C. 谷氨酸 D. 半光氨酸 4. 蛋白质工程制造的蛋白质是( )
A. 天然蛋白质 B. 稀有蛋白质 C. 自然界中不存在的蛋白质 D. 血红蛋白质 5. 蛋白质工程的基础是( )
A. 基因工程 B. 细胞工程 C. 酶工程 D. 发酵工程
6. 玉米是生产赖氨酸的好材料,可是产量低,需要改变什么结构就能提高产量( )
A. 天冬氨酸激酶 B. 二氢吡啶二羧合成酶 C. 肽酶 D. A、B都是 7. 天然蛋白质合成遵循的法则是( )
A. 中心法则 B. 转录 C. 翻译 D. 复制 8. 关于蛋白质工程的说法错误的是( )
A. 蛋白质工程能定向改造蛋白质的分子结构,使之更加符合人类的需要 B. 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子结构
C. 蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子 D. 蛋白质工程又称为第二代基因工程
9. 蛋白质工程的基本操作程序正确的是( ) ① 蛋白质分子结构合成 ② DNA合成 ③ mRNA合成
④ 蛋白质的预期功能
⑤ 根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列 A. ①→②→③→④→⑤→① B. ⑤→④→③→②→①→② C. ④→①→⑤→②→③→① D. ②→③→⑤→①→②→④
10. 下列各项与蛋白质结构多样性无关的是( )
A. 氨基酸的种类、数目、排列顺序 B. 构成蛋白质的多肽链的数目
C. 构成蛋白质的肽链的空间结构 D. 氨基酸至少含一个氨基和一个羧基
11. 蛋白质工程中直接操作的对象是( )
A. 氨基酸的结构 B. 蛋白质空间结构 C. 肽链结构 D. 基因结构
12. 当前医学上,蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代治疗剂,则基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是( )
A. 都与天然产物完全相同 B. 都与天然产物不相同
C. 基因工程药物与天然产物完全相同,蛋白质工程药物与天然产物不相同 D. 基因工程药物与天然产物不相同,蛋白质工程药物与天然产物完全相同
13. 植物组织培养是指( )
A. 离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织
B. 愈伤组织培育成植株
C. 离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体 D. 愈伤组织形成高度液泡化组织
14. 植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是( ) A. 植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁
B. 细胞壁使原生质体失去活力 C. 细胞壁阻碍了原生质体的融合 D. 细胞壁不是原生质的组成部分 15. 植物体细胞杂交的结果是( ) A. 产生杂种植株 B. 产生杂种细胞 C. 原生质体融合 D. 形成愈伤组织 16. 科学家把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合,培育出的驱蚊草含有香茅醛,能散发出一种特殊的达到驱蚊且对人体无害的效果。下列关于驱蚊草培育的叙述中,错误的是( )
A. 驱蚊草的培育属于细胞工程育种,其优点是能克服远源杂交不亲和的障碍
B. 驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或离心、振动、电刺激等方法
C. 驱蚊草培育过程是植物体细胞杂交,不同于植物组织培养,无愈伤组织和试管苗形成
D. 驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离
17. 将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时,下列条件中不需要的是( ) A. 具有完整细胞核的细胞 B. 一定的营养物质和植物激素 C. 离体状态 D. 导入指定基因 18. 植物体细胞杂交的目的中错误的是( )
A. 把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上 B. 获得杂种植株 C. 克服远源杂交不亲和的障碍 D. 实现原生质体的融合 19. 植物组织培养的用途中不正确的是( ) A. 快速繁殖 B. 生产新品种 C. 生产生物碱 D. 生产白细胞介素-2
20. A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如下图所示(仅显示细胞核),将A、B两种植物细胞去掉细胞壁后,诱导二者的原生质体融合,形成单核的杂种细胞,若经过组织培养后得到了杂种植株,则该杂种植株是( )
A. 二倍体;基因型是DdYyRr B. 三倍体;基因型是DdYyRr C. 四倍体;基因型是DdYyRr
D. 四倍体;基因型是DdddYYyyRRrr
21. 以下关于原生质的叙述,正确的是( )
A. 原生质泛指细胞内的基质 B. 原生质就是细胞质
C. 一个动物细胞就是一团原生质 D. 细胞膜、细胞核和细胞壁是原生质
22. 不能人工诱导原生质体融合的方法是( )
A. 振动 B. 电刺激 C. PEG试剂 D. 重压 23. 植物细胞表现出全能性的必要条件是( ) A. 给予适宜的营养和外界条件 B. 导入其他植物细胞的基因
C. 脱离母体后,给予适宜的营养和外界条件 D. 将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内 24. 细胞具有全能性的原因是( )
A. 生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能 B. 生物体的每一个细胞都具有全能性
C. 生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因 D. 生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的 25. 植物组织培养过程中的脱分化是指( ) A. 植物体的分生组织通过细胞产生新细胞 B. 未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C. 植物的器官、组织或细胞,通过离体培养产生愈伤组织的过程 D. 取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 26. 下列植物细胞全能性最高的是( )
A. 形成层细胞 B. 韧皮部细胞 C. 木质部细胞 D. 叶肉细胞 27. 植物组织培养过程的顺序是( )
① 离体的植物器官、组织或细胞 ② 根、芽 ③ 愈伤组织 ④ 脱分化
⑤ 再分化 ⑥ 植物体
A. ①④③⑤②⑥ B. ①④③②⑤⑥ C. ①⑤④③②⑥ D. ⑥①④③⑤②
28. 将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时,下列条件中不需要的是( ) A. 具有完整细胞核的细胞 B. 一定的营养物质和植物激素 C. 离体状态 D. 导入指定基因 29. 下列有关细胞工程的叙述不正确的是( ) A. 在细胞整体水平上定向改变遗传物质 B. 在细胞器水平上定向改变遗传物质
C. 在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质 D. 在细胞整体水平上获得细胞产品
30. 下列细胞全能性最高的是( ) A. 植物的卵细胞 B. 植物的精子细胞 C. 被子植物的受精卵
D. 被子植物的的叶肉细胞
31. 植物体细胞杂交的目的是( )
A. 用酶解法去掉细胞壁分离出有活力的原生质体 B. 以人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合
C. 用植物组织培养法培养融合的原生质体得到杂种植株 D. 通过以上三者来完成
32. 下列提法正确的是( )
A. 原生质专指细胞质 B. 人体内的水都属于原生质 C. 细胞核不是原生质 D. 一个动物细胞就是一团原生质 33.(多选)有关原生质体的下列叙述中,正确的是( ) A. 组成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸 B. 原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者之间的原生质 C. 被脱掉细胞壁的植物裸露细胞是原生质体 D. 原生质体只能用于植物细胞工程
34.(多选)下图为植物组织培养过程示意图,则下列叙述正确的是(
A. 植物组织培养依据的生物学原理是细胞的全能性 B. ③→④过程是指植物的营养生长和生殖生长阶段
C. 将①经脱分化培养成②时,再植上人造种皮即可获得人工种子
D. ②→③的再分化过程中,诱导②生根的激素为细胞素和生长素35、基因工程操作的三大基本元件是 ( ) I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体 V 配体 A I + II + III B I + III + IV C II + III + IV D II + IV + V E III + IV + V
36、基因工程的单元操作顺序是 ( ) A 增,转,检,切,接 B 切,接,转,增,检 C 接,转,增,检,切 D 检,切,接,增,转 E 切,接,增,转,检
37、mRNA 分离纯化技术的关键是 ( ) A 细胞的温和破碎
B 分离系统中不得含有痕量的 SDS
)
C 高离子强度缓冲液的使用 D 密度梯度超离心 E 严防核酸酶的降解
38、cDNA 第一链合成所需的引物是 ( ) A Poly A B Poly C C Poly G D Poly T E 发夹结构
39、cDNA 法获得目的基因的优点是 ( ) A 成功率高 B 不含内含子 C 操作简便
D 表达产物可以分泌 E 能纠正密码子的偏爱性
40、下列基因元件中属于反式元件的是 ( ) A 阻遏蛋白 B 启动子 C 操作子 D 终止子 E 增强子
41、包涵体是一种 ( ) A 受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒 B 大肠杆菌的亚细胞结构
C 噬菌体或病毒 DNA 的体外包装颗粒 D 用于转化动物细胞的脂质体 E 外源基因表达产物的混合物
42、在基因工程中,外源基因表达产物的重折叠通常是指 ( ) A 氢键的形成 B 离子键的形成 C 疏水键的形成 D 酰胺键的形成 E 二硫键的形成
43、外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是 【 】
I 融合基因能稳定扩增 II 融合蛋白能抗蛋白酶的降解 III 表达产物易于亲和层析分离 A III
B I + II C I + III D II + III E I + II + III
44、基因工程菌中重组质粒的丢失机制是 ( ) A 重组质粒渗透至细胞外
B 重组质粒被细胞内核酸酶降解 C 重组质粒在细胞时不均匀分配 D 重组质粒杀死受体细胞
E 重组质粒刺激受体细胞提高其通透性
45、细胞具有全能性的原因是 ( )
A.生物体细胞具有发育成完整个体的潜能 B.生物体的每一个细胞都具有全能性
C.生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因 D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的
46、植物组织培养过程中的脱分化是指 ()
A.植物体的分生组织通过细胞产生新细胞 B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C.植物的器官、组织或细胞,通过离体培养产生愈伤组织 D.取植物的枝芽培育成一株新植株的过程 47、与传统育种相比,植物体细胞杂交在育种作物新品种方面的重大突破表现在 ( )
A.证明杂种细胞具有全能性 B.克服远缘杂交不亲和的障碍 C.缩短育种周期,减少盲目性
D.快速培育无病毒植株,保留杂种优势
48、某同学在学习“细胞工程”时,列表比较了动植物细胞工程的有关内容,你认为有几处是不正确的是 ( ) 植物细胞工程 动物细胞工程 动物细胞培养植物组织培养、技术手段 和融合、单抗制植物体细胞杂交 备等 机械法去除细胞胰蛋白酶处理 特殊处理 壁 制细胞悬浮液 物理方法、化学物理方法、化学融合方法 方法 方法、生物方法 人工种子、杂种单克隆抗体的典型应用 植物 制备 培养液区蔗糖是离体组织动物血清不可别 赖以生长的成分 缺少 A.0 B.1 C.2 D.3
49、下列关于植物体细胞杂交过程的叙述中,不正确的是 ( )
A.用酶解法去掉细胞壁分离出有活力的原生质体 B.诱导两种植物的原生质体融合进而形成杂种细胞 C.单个的杂种细胞在组织培养过程中不要经过脱分化 D.杂种细胞最终培养为杂种植株
50、下列哪种生物技术能有效的打破物种的界限,定向地改造生物的遗传性状,培育新的农作物优良品种 ( )
A.单倍体育种技术 B.诱变育种技术 C.杂交育种技术 D.细胞工程技术 51、动物细胞培养的理论基础是 ( )
A.细胞 B.细胞分化 C.细胞全能性 D.细胞癌变
52、单克隆抗体的制备过程中引入骨髓瘤细胞的目的是 ( )
A.能使杂交细胞大量增殖 B.产生特异性强的个体 C.是细胞融合容易进行 D.是产生的抗体纯度更高
53、下列关于动物细胞培养的叙述中,不正确的是 ( )
A.动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散开来 B.通常将动物组织细胞消化后的初次培养称为原代培养 C.细胞的癌变通常发生在原代培养向传代培养的过渡过程中
D.传代培养的细胞在传至10~50代左右时,部分细胞的核型可能发生变化 54、目前在治疗癌症方面,一种疗效高,毒副作用小的新型药物问世了,这就是
“生物导弹”。“生物导弹”治疗疾病的基本原理是 ( )
A.癌细胞的识别作用
B.放射性同位素的标记作用 C.化学药物的特异性 D.单克隆抗体的导向作用
55、在下列自然现象或科学研究成果中,能为“动物细胞具有全能性”观点提供直接证据的是 ( )
A.壁虎断尾后重新长出尾部
B.蜜蜂的未受精卵细胞发育成雄蜂 C.用体外培养的皮肤治疗烧伤病人 D.小鼠腺细胞的自我复制 56、细胞株的特点是 ( )
A.遗传物质没有改变,可以无限传代 B.遗传物质发生改变,不可无限传代
C.遗传物质没有改变,不可无限传代
D.遗传物质发生改变,有癌变特点,可以无限传代
57、生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界
上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是 ( )
A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体
B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体
C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中,经孕育培养成新个体
D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体
58、酶工程的技术过程是 ( ) A、利用酶的催化作用将底物转化为产物 B、通过发酵生产和分离纯化获得所需酶 C、酶的生产与应用
D、酶在工业上大规模应用
59、酶的转换数是指 ( ) A、酶催化底物转化成产物的数量
B、每个酶分子催化底物转化为产物的分子数
C、每个酶分子每分钟催化底物转化为产物的分子数 D、没摩尔酶催化底物转化为产物的摩尔数
60、有些酶在细胞进入平衡期以后还可以继续合成较长的一段时间,这是由于
( )。
A、该酶所对应的mRNA稳定性好 B、该酶所对应的DNA稳定性好 C、细胞自溶后使酶分泌出来 D、培养基中还有充足的营养成分 61、莫诺德常数是指 ( ) A、反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。
B、比生长速率达到最大比生长速率一半时的性基质浓度。 C、产酶速率达到最大产酶速率一半时的性基质浓度。
D、细胞生长速率达到最大细胞生长速率一半时的性基质浓度。 62、端粒酶是 ( ) A、催化端粒水解的酶 B、存在于端粒中的酶
C、催化端粒生成和延长的酶 D、催化RNA生成和延长的酶 63、酶分子的物理修饰是通过物理方法改变酶分子结构而改变酶的催化特性( ) A、组成单位 B、侧链基团 C、空间构象 D、空间构型
、酶分子氨基酸修饰的分子修饰 ( ) A、只能用于核酸类酶 B、只能用于蛋白类酶
C、可以用于蛋白类酶和核酸类酶
D、不能用于蛋白类酶和核酸类酶
65、用带负电荷的载备的固定化酶后,酶的最适pH ( )。 A、向碱性一侧移动 B、向酸性一侧移动 C、不改变 D、不确定
66、有机介质中酶催化的最适水含量是 ( ) A、酶溶解度达到最大时的含水量 B、底物溶解度最大时的含水量
C、酶催化反应速度达到最大时的含水量 D、酶活力到最大时的含水量
67、在获得酶的单一基因以后,为获得两种以上同源正突变基因,可以采用的技术是 ( ) A、易错PCR
B、交错延伸PCR C、DNA重排 D、基因组重排
68、采用核糖体表面展示技术,可以形成目的蛋白-核糖体m-RNA三聚体展示在核糖体表面,是由于 ( ) A、目的蛋白基因在体外进行转录和翻译 B、核糖体表面有目的蛋白的结合位点
C、转录得到的mRNA的3’末端缺失终止密码子 D、核糖体可以识别mRNA和目的蛋白
69、在进行易错PCR时,添加一定浓度的锰离子,其作用是 ( ) A、降低DNA聚合酶对模板的特异性 B、提高DNA聚合酶对模板的特异性 C、增强DNA聚合酶的稳定性 提高DNA聚合酶的活力
70、酶的膜反应器是 ( ) A、将酶催化反应与膜分离组合在一起 B、利用酶膜进行反应
C、利用半透膜进行底物与产物分离 D、利用半透膜进行酶与产物分离
71、葡萄糖氧化酶可以用于食品保鲜,主要原因是通过该酶的作用可以( )。 A、生成过氧化氢 B、生成葡萄糖酸 C、杀灭细菌 D、除去氧气 72、蛋白质工程的实质是 ( )
A. 改变氨基酸结构 B. 改造蛋白质结构 C. 改变肽链结构 D. 改造基因结构 73、蛋白质工程制造的蛋白质是 ( )
A. 天然蛋白质 B. 稀有蛋白质 C. 自然界中不存在的蛋白质 D. 血红蛋白质
74、蛋白质工程的基本操作程序正确的是 ( )
① 蛋白质分子结构合成 ② DNA合成 ③ mRNA合成 ④ 蛋白质的预期功能
⑤ 根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列 A. ①→②→③→④→⑤→① B. ⑤→④→③→②→①→② C. ④→①→⑤→②→③→① D. ②→③→⑤→①→②→④
75、下列各项与蛋白质结构多样性无关的是 ( )
A、氨基酸的种类、数目、排列顺序 B、构成蛋白质的多肽链的数目
C、构成蛋白质的肽链的空间结构 D、氨基酸至少含一个氨基和一个羧基 76、蛋( ) 结构
白
质
工
程
中
直
接
操
作
的
对
象
是
A、氨基酸的结构 B、蛋白质空间结构 C、肽链结构 D、基因
77、当前医学上,蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代
治疗剂,则基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是 ( )
A、都与天然产物完全相同 B、都与天然产物不相同
D、基因工程药物与天然产物不相同,蛋白质工程药物与天然产物完全相同 78、关于蛋白质工程的说法错误的是 ( )
A、蛋白质工程能定向改造蛋白质的分子结构,使之更加符合人类的需要 B、蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子结构
C、蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
D、蛋白质工程又称为第二代基因工程
79、扰素经过改造可长期储存,从蛋白质水平上应改变的是 ( ) A. 光氨酸 B. 精氨酸 C. 谷氨酸 D. 半光氨酸 80、天然蛋白质合成遵循的法则是( )
A. 中心法则 B. 转录 C. 翻译 D. 复制
C、基因工程药物与天然产物完全相同,蛋白质工程药物与天然产物不相同
三、判断题
1、基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。(×) 2、B型双螺旋DNA的稳定因素为氢键和碱基堆砌力。(√) 3、cDNA文库不包含内含子。(√)
4、Western杂交是DNA—RNA之间的杂交。(×)
5、DNA双酶切时,要先低盐缓冲液,后高盐缓冲液。(√)
6、如果需要得到真核生物基因的完整序列,必须用基因组文库方能达到。(√) 7、基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。(×) 8、克隆的本质特征是生物个体在遗传组成上的完全一致性。(√) 9、假基因不能合成功能蛋白质,是相应的正常基因突变引起的。(√) 10、Northern杂交是DNA-RNA之间的杂交。(√)
11、核酸Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关,碱基数相同的情况下,其含量越高,则Tm越高。(√)
12、农杆菌介导法和基因法是植物转化的主要方法(√) 13、(√)有一些来源不同的性内切酶识别的是同样的核苷酸序列,这类酶称为同裂酶。
14、检测外源基因的导入时,PCR的准确性要高于Southern杂交的准确性。(×) 15、转基因食品目前存在的最大问题是我们无法检测某种食品到底是不是转基因食品。(×)
16、转基因生物直接食用的,称为“转基因食品”,而作为加工原料生产的食品,则不能被称为“转基因食品”。 (×)
17、质粒DNA进行电泳时,其三种构型中,开环DNA跑的最快,共价闭环形DNA跑得最慢。(×)
18、在生物技术的五大工程中,生化工程是核心技术,它能带动其他技术的发展。(×)
19、cDNA是以DNA为起始材料,经过复制得到的互补DNA。(×) 20、DNA的复制是全保留不连续复制。(×)
21、基因是一个功能单位,但不是一个不可分割的最小的重组单位和突变单位。(√)
22、Western杂交可以检测外源DNA的导入与否。(×)
23、生物技术是一门新兴的学科。(×)
24、生物技术是现实生产力,也是具有巨大经济效益的潜在生产力,它将是21
世纪高技术的核心内容。(√)
25、生物技术是由多学科综合而成的一门新学科。(√)
26、自1996年11月我国正式公布实施《农业生物基因工程安全管理实施办法》以来,我国已批准6种转基因植物商品化。(√)
27、1977年,美国首先采用大肠杆菌生产了人类第一个基因工程药物——人生长激素释放抑制剂激素。(√)
28、生物技术是一门新兴学科,它包括当代生物技术和现代生物技术两部分.(√) 29、生物技术主要包括五项技术(工程)。(√)
30、现代生物技术是所有自然科学领域中涵盖范围最广的学科之一。(√) 31、本世纪初,遗传学的建立及其应用,产生了遗传育种学,并于60年代取得
了辉煌的成就,被誉为“第一次绿色”。( √) 32、人类基因组计划英文简称为 HGP.(√) 33、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体(×)
34、进入细菌的外来DNA之所以被降解,是因为细菌只修饰自身DNA,不修饰外来DNA(×)
35、只有粘粒端才可以被连接起来(×)
36、用自身作引物合成的cDNA链,往往cDNA并不完整(×)
37、所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板,这样产生的
双链DNA分子由一条旧链和一条新链组成。(√) 38、任何细胞都可用作受体细胞。(×) 39、克隆子就是重组子。(×)
40、原核生物细胞是最理想的受体细胞。(√)
41、目的基因来源于各种生物,其中真核生物染色体基因组是获得目的基因的主要来源。(√)
42、E.coli DNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。(√) 43、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。 ( ╳) 44、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。 (√ )
45、酶活力指在一定条件下酶所催化的反应速度,反应速度越大,意味着酶活力越高。 (√)
46、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。 (√)
47、培养基中的碳源,其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。 (╳) 48、膜分离过程中,膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过,而把大于其孔径的颗粒截留。 (√)
49、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对,在酶的亲和层析分离中,可把分子对中的任何一方作为固定相。 (√) 50、 角叉菜胶也是一种凝胶,在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。 (╳) 51、α-淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化,但不称为糊精化酶。 (╳) 52、酶法产生饴糖使用α-淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。 (╳) 53、外源蛋白基因可以与噬菌体的外膜结构蛋白基因形成融合蛋白基因,在噬菌体表面展示 (╳)
54、重组质粒载体可以通过细胞转化方法将重组DNA转入受体细胞 (√) 55、通过DNA重拍技术进行酶基因的体外随机突变,可以获得大量的正突变基因。
(╳ )
56、基因家族重排技术需要经过不加引物的多次PCC循环,使DNA的碱基序列重新排布而引起基因突变。 (√) 57、酶在水溶液中催化的立体选择性通常比在有机介质中催化的立体选择性强。
(√)
58、包埋法可以用于酶、细胞和原生质体的固定化。 (√) 59、固定化原生质体由于细胞内的结构完整,可以保持细胞原有的生命活动能力。
(╳ )
60、采用共价结合法制备得到的固定化细胞具有很好的稳定性。 (√)
四、填空题
1、 基因工程技术是生物技术的核心技术。 2、 PCR包括三个步骤_变性,退火,延伸。
3、基因工程的实施包括四个必要条件:工具酶、基因、载体和受体细胞。 4、性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端:平末端、黏性末端。 5、基因组文库中包括有内含子和外显子,而cDNA 文库中则不含内含子
6、生物技术主要是指基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程。 7、现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志。
8、细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、干细胞技术。
9、酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计等技术。
10、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、 筛选和鉴定克隆子。 11、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、筛选和鉴定克隆子。
12、重组DNA导入植物细胞常采用农杆菌介导的Ti质粒载体转化法、电穿孔法、微弹轰击法、花粉管通道法。导入动物细胞常用的方法有病毒颗粒介导的病毒载体转导法、磷酸钙转染法、显微注射法等。
13、酶的生产方法有提取法,发酵法和化学合成法。
14、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能,即提高酶的活力、减少抗原性,增加稳定性。 15、根据分子中起催化作用的主要组分的不同,酶可以分为 蛋白酶 和 核酶 两大类。 16、莫诺德常数Ks是指生长速率达到最大比生长速率一半,性基质浓度 时的 性基质浓度 。
17、发酵动力学是研究发酵过程中细胞生长速率,产物生成速率 ,基质消耗速率及其影响因素的学科。
18、微生物产酶方式可以分为同步合成型,延续合成型,中期合成型,滞后合成型四种。
19、动物细胞培养方法主要有悬浮培养,贴壁培养、固定化细胞培养。
20、定点突变是在DNA序列的 某一特定位点上,进行碱基的改变,从而获得 突变基因 的操作技术。
21、锤头型核酸类酶含有11 个保守核苷酸残基和 3 个螺旋结构域。
22、通过人工方法获得的具有催化RNA水解的单链DNA分子,称为 脱氧核酸类酶。
23、细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、干细胞技术。
24、酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计等技术。
25、蛋白质工程的目标是根据对蛋白质 功能 的特定需求,对蛋白质 结构 进行分子设计,根据 中心 法则便可以改造天然蛋白质。
五、简答题
1、基因工程操作过程的主要步骤有哪些? ①分离或合成基因;
②通过体外重组将基因插入载体; ③将重组DNA导入细胞; ④扩增克隆的基因; ⑤筛选重组体克隆;
⑥对克隆的基因进行鉴定或测序; ⑦控制外源基因的表达;
⑧得到基因产物或转基因动物、转基因植物
2、一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足的条件是什么? (1)具有转录复制起始点。 (2)具有抗菌素抗性基因。
(3)具有若干酶切单一识别位点。 (4)具有较小的分子量和较高的拷贝数。 3、重组子筛选所用的核酸分析法的内容是什么? 1)核酸杂交法
①菌落印迹原位杂交; ②斑点印迹杂交; ③Southern印迹杂交 2)聚合酶链式反应法 3)DNA测序法
4、基因工程研究的理论依据是什么? (1)不同基因具有相同的物质基础。 (2)基因是可切割的 (3)基因是可以转移的
(4)多肽与基因之间存在对应关系 (5)遗传密码是通用的
(6)基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代 5、分离目的基因的途径有哪些? (1)酶切法 (2)PCR法 (3)化学合成法
(4)基因组或cDNA文库法 6、谈谈你对转基因食品的看法。
转基因食品的优点:
(1)可延长蔬菜的货架期及感官特性。 (2)提高食品的品质。 (3)提高食品的营养。
(4)提高肉、奶和畜类产品的数量和质量。
(5)增加农作物抗逆能力,增加农业产量。 (6)生产可食性疫苗或药物 (7)生物功能性食品 转基因食品的安全性
(1)目前有一些证据指出转基因食品具有潜在的危险。 (2)但更多科学家的试验表明转基因食品是安全的
任何一种转基因食品在上市之前都进行了大量的科学试验,国家和有相关的法律法规进行约束,而科学家们也都抱有很严谨的治学态度。一种食品会不会造成中毒主要是看它在人体内有没有受体和能不能被代谢掉,转化的基因是经过筛选的、作用明确的,所以转基因成分不会在人体内积累,也就不会有害。 7、目的基因克隆的基本方法有哪些? (1)直接从染色体DNA中分离:
仅适用于原核生物、叶绿体和线粒体基因的分离,较少采用。 (2)人工合成:
根据已知多肽链的氨基酸顺序,利用遗传密码表推定其核苷酸顺序再进行人工合成。适应于编码小分子多肽的基因。 (3)从mRNA合成cDNA:
采用一定的方法钓取特定基因的mRNA,再通过逆转录酶催化合成其互补DNA(cDNA),除去RNA链后,再用DNA聚合酶合成其互补DNA链,从而得到双链DNA。这一方法通常可得到可表达的完整基因。 (4)利用PCR合成:
如已知目的基因两端的序列,则可采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,在体外合成目的基因。 (5)从基因文库中筛选:
首先建立基因组或cDNA文库,利用探针从文库中筛选目的克隆。 8、cDNA文库和基因组文库的主要差别有哪些?
(1)基因组文库克隆的是任何基因,包括未知功能的DNA序列;cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因,包括调节基因。
(2)基因组文库克隆的是全部遗传信息,不受时空影响;cDNA文库克隆的是不完全的编码DNA序列,因它受发育和因子的影响。
(3)基因组文库中的编码基因是真实基因,含有内含子和外显子,而cDNA文库克隆的是不含内含子的功能基因。
9、简述一项可以授予专利的生物技术发明必须满足的条件。 (1)具有新颖性 (2)具有创造性 (3)具有应用价值
(4)在申请专利说明书对发明做详尽的描述,使在同一领域的其他人能够了解执行。
10、重组DNA 导入受体细胞方法 (1)化合物诱导法 (2)电穿孔法
(3)农杆菌介导基因转化法 (叶盘法) (4)微弹轰击法 (5)超声波处理法 (6)脂质体介导法 (7)体内注射转化法 (8)精子介导法
11、简述现代生物技术在人类生产生活中的作用 (1)改善农业生产、解决食品短缺
①提高农作物产量及其品质(培育抗逆的作物优良品系、植物种苗的工厂化生产 、提高粮食品质、生物固氮,减少化肥使用量 、生物农药,生产绿色食品 )
②发展畜牧业生产(动物的大量快速无性繁殖 、培育动物的优良品系 ) (2)食品生产、食品加工、食品检测
(3)提高生命质量、延长人类寿命(开发制造奇特而又贵重的新型药品 、疾
病的预防和诊断、基因治疗 )
(4)解决能源危机、治理环境污染(解决能源危机 、环境保护 ) (5)制造工业原料、生产贵重金属 (制造工业原料 、生产贵重金属 ) 12、科学家将分离得到的成熟的胡萝卜根的韧皮部细胞进行培养,由单个细胞发育成了完整的新植株。过程图解如下,请回答与之有关的问题:
(1)科学家所用的这种生物技术叫做 植物组织培养 ,这个实验表明 高度分化的植物细拔仍然具有发育成完整植物的能力 。
(2)通过B过程产生的愈伤组织的细胞与根的韧皮部细胞在染色体的数目上是否相同? 相同 ;染色体上所含的遗传信息是否相同? 相同 ;细胞的形态结构是否相同? 不同 。 13、工业化菌种的要求?
(1)原料廉价、生长迅速、繁殖能力强、目的产物产量高。
(2)发酵中产生的泡沫少,易于控制培养条件,酶活性高,发酵周期短。 (3)抗杂菌和噬菌体的能力强。
(4)不产生或少产生与目标产物相近的幅产物。
(5) 菌种遗传性稳定,不易变异和退化
(6)不产生任何有害的生物活性物质和毒素,保证安全生产。 14、什么是种子的扩大培养?
种子扩大培养是发酵生产的第一道工序。就是将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接种到试管斜面活化后,再经过摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。 15、什么是一类发酵?二类发酵?三类发酵?
一类发酵:产物形成与底物利用直接相关,为生长联系型,又称简单发酵型,产物直接由碳源代谢而来,产物生成速度的变化与微生物对碳源利用速度的变化是平行的,产物生成与微生物的生长也是平行的。在这些发酵过程中,菌体的生长、基质的消耗、产物的生成三个速度都有一个高峰,三高峰几乎同时出现。 二类发酵:产物形成与底物利用间接相关,为部分生长联系型,又称中间发酵型,产物不是碳源的直接氧化产物,而是菌体代谢的主流产物。它的特点是在发酵的第一时期碳源大量消耗用于菌体的迅速增长而产物的形成很少或全无,第二时期碳源大量消耗用于产物的高速合成及菌体的生长。
三类发酵:产物形成与底物利用不相关,为非生长联系型,又称复杂发酵型,产物的生成在菌体生长和基质消耗完以后才开始,与菌体生长不相关,与基质消耗无直接关系,所形成的产物为次级代谢产物。
16、什么是产物促进剂?产物促进剂举例?
是指那些非细胞生长所必须的营养物,又非前体,但加入后却能提高产量的添加剂。如:链霉素生产加巴比妥,赖氨酸生产加红霉素等。如加入微量的“九二O”可以促进某些放线菌的生长,缩短发酵周期,提高抗生素的产量,因此起到生长因素的作用。还有在四环素发酵中加入硫氰化苄,菌体呼吸强,糖代谢快,而抗生素合成受阻,所以降低菌体呼吸,产量就会提高。
17、为什么属于滞后合成型的酶要在细胞生长一段时间甚至进入平衡期以后才开始合成?
答:属于滞后合成型的酶,之所以要在细胞生长一段时间甚至进入平衡期后才开始合成,主要有两个原因:一是由于酶的生物合成受到培养基中阻遏作用,只有随着细胞的生长,阻遏物几乎被细胞用完而解除阻遏以后,酶才开始大量合成;二是由于该类型酶对所对应的mRNA稳定性好,可以在细胞生长进入平衡期后的相当长的一段时间内,继续进行酶的生物合成。 18、何谓抗体酶?试述获得抗体酶的主要方法。
答:抗体酶(abzyme)又称为催化性抗体(catalytic antibody),是一类具有生物催化功能的抗体分子。
抗体酶的制备方法主要有诱导法,修饰法等。
修饰法是对抗体进行分子修饰,在抗体与抗原的结合部位引进催化基因,而成为抗体酶的方法。
诱导法是利用特定的抗原诱导抗体酶合成的方法,根据所采用的抗原不同,诱导法有半抗原诱导法和酶蛋白抗原诱导法。
半抗原诱导法是以预先设计的过渡态类似物作为半抗原,与载体蛋白(如牛血清蛋白等)偶联制成抗原,然后免疫动物,再经过单克隆抗备技术制备、分离、筛选得到所需的抗体酶。
酶蛋白抗原诱导抗体酶的生成是以某种外源酶蛋白作为抗原诱导抗体酶产生的方法。首先选定一种酶蛋白作为抗原免疫动物,在酶蛋白抗原的诱导下,动物体内产生与酶分子特异结合的抗体,再将获得的酶抗体免疫动物,并采用单克隆抗体技术制备得到与酶抗体特异结合的抗抗体。那么,抗抗体结合部位的构象与用作抗原的酶分子的结合中心的构象相同,对抗抗体进行筛选,就有可能获得具有催化活性的抗体酶。
19、简述定点突变技术的主要技术过程及其在酶分子修饰中的应用
3、答:定点突变是在DNA序列中的某一特定位点上进行碱基的改变从而获得突变基因的操作技术。
定位突变技术用于酶分子修饰的主要过程如下: (1)、新的酶分子结构的设计
根据已知的酶RNA或酶蛋白的化学结构和空间结构及其特性,特别是根据酶在催化活性、稳定性、抗原性和底物专一性等方面存在的问题,合理设计新的酶RNA的核苷酸排列次序或酶蛋白的氨基酸排列次序,确定欲置换的核苷酸或氨基酸及其位置。
(2)、突变基因碱基序列的确定
对于核酸类酶,根据欲获得的酶RNA的核苷酸排列次序,依照互补原则,
确定其对应的突变基因上的碱基序列,确定需要置换的碱基及其位置。
对于蛋白类酶,首先根据欲获得的酶蛋白的氨基酸排列次序,对照遗传密码,确定其对应的mRAN上的核苷酸序列,再依据碱基互补原则,确定突变基因上的碱基序列,并确定需要置换的碱基及其位置。
(3)、突变基因的获得
根据欲获得的突变基因的碱基序列及其需要置换的碱基位置,首先用DNA合成仪合成含有被置换了碱基的寡核苷酶,再用此寡核苷酶为引物通过聚合酶链反应(PCR)等技术获得所需的大量突变基因。
(4)、新酶的获得
将上述定位突变获得的突变基因进行体外重组,插入到适宜的基因载体中,然后通过转化、转导、介导、基因、显微注射等技术,转入到适宜的宿主细胞,再在适宜的条件下进行表达,就可获得经过修饰的新酶。
定点突变技术在酶分子修饰中试一种行之有效的常用方法,定点突变技术为氨基酸置换修饰和核苷酸置换修饰提供了先进、可靠的手段。 20、何谓固定化酶?固定化酶的特性与游离酶的比较有哪些改变?
2、答:固定化酶是指固定在一定载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。
固定化酶既保持了酶的催化功能,又克服了游离酶的不足之处,具有提高酶的催化效率,增强稳定性,可反复或连续使用以及易于和反应产物分开等显著优点。
固定化酶与游离酶比较,其催化特性主要有下列变化:
(1)固定化酶的稳定性一般比游离酶的稳定性好,主要表现在:对热稳定性提高,可以耐受较高的温度;保存稳定性好,可以在一定条件下保存较长时间;对蛋白酶的抵抗性增强,不易被蛋白酶水解;对变性剂耐受性提高,在尿素、有机溶剂和盐酸胍等蛋白质变性剂 的作用下,仍可保留较高的酶活力等。
(2)固定化酶的最适作用温度一般与游离酶差不多,活化能也变化不大,但也有些固定化酶的最适温度与游离酶比较会有较明显的变化。
(3)酶经过固定化后,其作用的最适pH往往会发生一些变化。
(4)固定化酶的底物特异性与游离酶比较可能有些不同,其变化与底物相对分子质量的大小有一定关系。对于那些作用于低分子底物的酶,固定化前后的底物特异性没有明显改变。而对于那些可作用于大分子底物,又可作用于小分子底物的酶而言,固定化酶的底物特异性往往会发生变化。 21、选择酶反应器的主要依据有哪些?
答:酶反应器的选择是在了解酶反应器的各种类型和特点的基础上,主要依据酶的应个形式、酶的反应动力学性质、底物和产物的理化性质等几个方面进行。 (1)依据酶的应用形式选择反应器:酶的应用形式主要有游离酶和固定化酶,酶的应用形式不同,其所使用的反应器亦有所不同。在应用游离酶进行催化反应时,酶与底物均溶解在反应溶液中,通过互相作用,进行催化反应,可以选用搅拌罐式反应器、鼓泡式反应器、喷射式反应器、膜反应器等。固定化酶具有稳定性较好,可以反复或连续使用的特点,应用固定化酶进行催化反应,可以选择填充床式反应器、流化床式反应器、鼓泡式反应器、膜反应器、搅拌器式反应器等。 (2)依据酶反应动力学性质选择反应器:在考虑酶反应动力学性质对反应器选择的影响方面,主要因素有酶与底物的混合程度、底物浓度对酶反应速度的影
响、反应产物对酶的反馈抑制作用以及酶催化作用的温度条件等。
(3)依据底物或产物的理化性质选择反应器:酶的催化反应是在酶的催化作用下,将底物转化为产物的过程。在催化过程中,底物和产物的理化性质直接影响酶催化反应的速率,底物或产物的相对分子质量、溶解性、黏度等性质也对反应器的选择有重要影响。
22、简述现代生物技术在人类生产生活中的作用 (1)改善农业生产、解决食品短缺
①提高农作物产量及其品质(培育抗逆的作物优良品系、植物种苗的工厂化生产 、提高粮食品质、生物固氮,减少化肥使用量 、生物农药,生产绿色食品 )
②发展畜牧业生产(动物的大量快速无性繁殖 、培育动物的优良品系 ) (2)食品生产、食品加工、食品检测
(3)提高生命质量、延长人类寿命(开发制造奇特而又贵重的新型药品 、疾
病的预防和诊断、基因治疗 )
(4)解决能源危机、治理环境污染(解决能源危机 、环境保护 ) (5)制造工业原料、生产贵重金属 (制造工业原料 、生产贵重金属 ) 23、谈谈你对转基因食品的看法。
1) 转基因食品的优点: 2) 转基因食品的安全性:
二、选择题
1. D 2. A 3. D 4. C 5. A 6. D 7. A 8. B 9. C 10. D 11. D 12. C 13. C 14. C 15. A 16. C 17. D 18. D 19. D 20. C 21. C 22. D 23. C 24. C 25. C 26. A 27. A 28. D 29. C 30. C 31. C 32. D 33. AC 34. ABD 35.A 36.B 37.E 38. T 39. B 40.A 41.E 42. E 43.B 44.B 45. C 46.C 47.B 48.B 49.C 50.D 51.A 52.A 53.C 54.D 55.B 56.C 57、C 58.C 59.C 60.A 61.B 62.C 63.C .C 65.A 66.C 67.A 68.A 69.C 70.A 71.D 72.D 73.C 74.C 75.D 76.D 77.C 78.B 79.D 80.A
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