维普资讯 http://www.cqvip.com
安徽农业科学，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｈｕｉ Ａｇｒｉ．Ｓｃｉ．２００６，３４（１８）：４６７４—４６７５，４７０２ 责任编辑 朱永和责任校对 范世群 ３种蛋白酶制备的鱼粉水解物的生根抑制活性的研究 张运佳 ，－，杨剑２，浦跃武 （１．华南理工大学生物科学与工程学院，Ｆ－Ｙ，Ｆ－），，￣ ｌ５１０６４ｏ；２．深圳职业技术学院应用化学与生物技术学 院，广东深圳５１８０５５） 摘要以碱性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶为水解酶制备出鱼粉多肽，用培养皿生物分析法检测不同鱼粉水解物在０，０．５—１、１．５— ２、２．５ ｍｇ／ｍ１）浓度下对多年生黑麦草种子种子萌发根系生长抑制活性．所有的数据分析均采用ＳＰＳＳ １３．０ ｆｏｒ Ｗｉｎｄｏｗｓ分析处理．结果表 明：３种鱼粉水解物对多年生黑麦草种子萌发根系生长均有抑制活性，且随着水解物浓度增加根系生长的抑制活性增强；碱性蛋白酶和 复合蛋白酶制备的鱼粉水解物的根系抑制活性要明显高于风味蛋白酶制备的鱼粉水解物。 关键词鱼粉水解物；生根抑制活性；蛋白酶 中图分类号Ｑ５５６ ．３ 文献标识码Ａ 文章编号０５１７—６６１１（２００６）ｌ８—４６７４—０２ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＯｎＲｏｏｔ－ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇＡｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ＇Ｉｔｌｒｅｅ鼬ＭｅａｌＨｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓＰｒｅｐａｒｅｄｗｉｔｈ＇ｎｌｒｅｅＰｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ＺＨＡＮＧ Ｙｕｎ－ｊｉａ ｅｔ ａｌ（Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｂｉｏｓｅｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇｉｌａｎｇｚｈｏｔｌ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１０６４０） Ａｂｓｌｒａｃｔ Ｔｈｒｅｅ ｆｉｓｈ ｍｅａｌ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ ｗｅｒｅ ｐｒｅｐ￣ａ ｗｉｈｔ ｔｔｕ＇ｅｅ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ（Ａｌｃａｌａｓｅ ２．４ Ｌ，Ｆｌａｖｏｕｒｚｙｍｅ ５００ ＭＧ ａｎｄ Ｐｒｏｔａｍｅｘ）ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｏｏｔ－ｉｎｈｉｂｉｔ— ｉｇｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｏｉｌ ｐｅｒｅｎｎｉａｌ ｒｙｅｇｒａｓｓ（￣ｌｉｕｍ ｐｅｒｅｎｎｅ Ｌ）ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｂｉｏａｓｓａｙ ｉｎ Ｐｅｔｒｉ ｄｉｓｈ ｗｉ山ａ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｓｅｒｉｅｓ ｏｆ０，０．５，１．０，１．５，２．０ ｎａｄ ２．５ ｍｇ／ｍ１．Ａ１ｌ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｅｓ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｎｎｅｄ ｗｉ山ｔｈｅ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｏｆＳＰＳＳ １３．０ ｆｏｒＷｉｎｄｏｗｓ．１ｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ｌａｌ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｆｉｓｈ ｍｅａｌ ｈｙ． ｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ ｅｘｈｉｂｉｔｄｅ ｒｅｏｔ－ｉｎｈｉｂｉｔｉｇｎ ａｃｔｉｖｉｔｉｙ ｔｏ Ｌｏｌｉｎｌｐｅｒｅｎｅ Ｌ，ａｎｄ ｔｈｅ ｈｉｈｇｅｒ ｈｔｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｗａｓ，ｔｈｅ ｇｒｅａｔｅｒｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ Ｗａｓ．Ａｌｃｌａａｓｅ ２．４ Ｌ ａｎｄ ｐｍｔａｍｅｘ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ ｓｈｏｗｅｄ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｇｒｅａｔｅｒ ｒｅｏｔ－ｉｈｎｉｂｉｔｉｇｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｈａｎ ｔｈｅ Ｆｌａｖｏｕｒｚｙｍｅ ５００ ＭＧ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ Ｆｉｓｈｍｅａｌ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ；Ｒｏｏｔ－ｉｈｎｉｂｉｔｉｇｎ ａｃｔｉｖｉｙｔ；Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ 使用除草剂控制杂草的历史可以追溯到１９２７年＿ｊ Ｊ。但 １．２方法 使用过程中化学除草剂弊端逐渐暴露。首先是化学除草剂 １．２．１鱼粉的预处理。为了使酶解反应充分，先用粉碎机 雾滴漂移，药液挥发，选择性不理想及降解产物的危害等原 将鱼粉粉碎，再过１００目（孔径０．４ ｍｍ）筛，收集筛下的褐色 因引起作物的药害；其次是反复使用除草剂造成耐药杂草种 粉末。 群的上升、抗除草剂杂草的出现和对环境污染１３趋严重＿２Ｊ。 １．２．２鱼粉蛋白含量的测定。参照ＧＢ／Ｔ ５００９．５—２００３，用 随着人们环境和公共健康意识的增强，开发出新的天然无毒 凯氏定氮测定鱼粉蛋白含量为５９．８９％。 副作用的除草剂被认为是杂草无公害防治的一条有效途 １．２．３鱼粉水解物的制备。按以下步骤进行： 径＿３Ｊ。较早的研究表明，某些植物组织的提取物及植物残体 （１）原料酶解。酶解反应在５００ ｍｌ三角瓶中进行，每个 在土壤中的分解物能抑制植物种子发芽［４－６Ｊ，其中对玉米组 三角瓶中加入３０ ｇ过筛后鱼粉原料蛋白及２７０ ｍｌ去离子水， 织提取物及凋落在土壤中的残体对植物种子萌发及幼苗生 用橡胶塞塞住瓶口。放入恒温水浴摇床振摇（１５０ ｒ／ｍｉｎ），待 长影响作了较广泛的研究ｌ７－８Ｊ。１９９１年，Ｃｈｒｉｓｔｉａｎｓ等发现玉 瓶内的温度达到酶的最佳反应温度时，用１０％的氨水调节反 米蛋白粉中的一些可溶性物质具有除草活性，可以作为天然 应体系至最适ｐＨ，然后按照１．５％（ｖ／ｗ，Ｗ／ｗ）的酶底比往 的萌前除草剂＿９ Ｊ。并在随后对玉米蛋白粉及其水解物的除 三角瓶加入蛋白酶，具体反应条件如表１。 草活性做了较全面的研究。此外，其他研究还发现豆粕对植 表１ ３种蛋白酶的最佳水解反应条件 物种子萌发生根有抑制作用。 由于玉米蛋白粉、豆粕为高蛋白原料，由此笔者推测：可 能其他的蛋白原料及其水解物对植物种子萌发也有抑制作 用，而除草活性强弱可能与水解物的组成有密切关系。由于 天然蛋白原料一般不溶于水，不能象其他除草剂那样制成水 剂喷施，从而其使用。为此，笔者以蛋白含量较高的鱼 反应过程中用ｐＨ计监测反应体系ｐＨ值的变化，用１０％ 粉为原料，用３种不同的酶将其水解制备成了３种鱼粉水解 氨水调节反应体系的ｐＨ值使之稳定在最适ｐＨ。反应结束 物，并检测了这些水解物对多年生黑麦草种子生根抑制活性 后１００℃煮沸１０ｍｉｎ灭酶，冷却后４５００ ｒ／ｍｉｎ离心２０ｍｉｎ，取 的强弱，为下一步分离具有更高生根抑制活性的成分奠定了 上清液经２层滤纸抽滤以除去上清液表面漂浮的脂肪及其 基础。 他杂质，滤过液进行下一步处理。 １材料与方法 （２）浓缩与冻干。将滤过液旋转蒸发浓缩１０倍，经超低 １．１材料鱼粉（秘鲁进口，深圳市华宝饲料有限公司提 温冷冻干燥，当腔体压力保持不变达２ ｈ时即达冻干终点，所 供）；碱性蛋白酶（Ａｌｃａｌａｓｅ ２．４ Ｌ）、风味蛋白酶（Ｆｌａｖｏｒｚｙｍｅ ５００ 得冻干粉末即为鱼粉水解物样品。 Ｍ Ｇ）和复合蛋白酶（Ｐｒｏｔａｍｅｘ）［购自诺维信（中国）有限公 １．２．４ ３种鱼粉水解物对多年生黑麦草种子的生根抑制活 司］、多年生黑麦草种子［Ｐｅｒｅｎｎｉａｌ ｒｙｅｇｒａｓｓ（１￣ｌｉｕｍｐｅｒｅｎｎｅ Ｌ）］。 性实验。选用多年生黑麦草种子作为鱼粉水解物生根抑制 作者简介张运佳（１９８２一），男，江西赣州人，硕士研究生，研究方向：杂 活性的检测材料，具体方法如下：用直径为９ ｃｍ的培养皿，皿 草无公害控制。 底垫一层滤纸；选择６个水解物的浓度梯度（０，０．５、１．０、１．５、 收稿日期２００６．０７．２１ ２．０、２．５ ｍｇ／ｎａ），每个浓度３个重复；每个皿中加入ｌ５颗饱满的 ◆ ■ 【维普资讯 http://www.cqvip.com
３４卷ｌ８期 张运佳等３种蛋白酶制备的鱼粉水解物的生根抑制活性的研究 ４６７５ 多年生黑麦草种子和２ｍｌ的多肽液，用封口膜封住培养皿边缘 的的空隙，放入光照培养箱培养。培养条件为：每天光照１６ ｈ， 温度２５℃，光照强度９０￣ｍｏｌ／（ｓ・ｍ２）；夜间温度１５℃。培养时 间为７ ｄ。培养结束后，测量种子根长苗长，计算其抑制率。 ２结果与分析 显著差异，需要进行Ｌｅａｓｔ．ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（ＬＳＤ）多重比 较，具体分析结果（表中数据为双尾检验Ｐ值）如下： 表２ ３种鱼粉水解物对多年生黑麦草种子萌发的影响 该实验所设计的需要统计分析的数据均使用ｓｐｓｓ １３．０ ｆｏｒ ｗｉｎｄｏｗｓ软件进行，数据中的平均值均使用平均值±标准 差（±ｓ）表示。在检验单一因素（多肽浓度、不同酶）的若干 分组（两组以上）中哪一组与其他组有显著性差异时，采用 ● Ｏｎｅ．Ｗａｙ ＡＮＯＶＡ过程进行分析。当组间方差齐次时，采用 Ｉ．ｅ，ａｓｔ．ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（ｔＳＤ）方法进行多重比较，组间方差 不齐次时则采用Ｔａｍｈａｎｅ’ｓ Ｔ２方法。设置显著性水平ａ为 譬 Ｏ．０５。Ｐ＜０．０５表示差异显著，Ｐ＜Ｏ．０１表示差异极显著。 ２．１ ３种鱼粉水解物对多年生黑麦草种子生根抑制活性的 比较 ２．１．１不同鱼粉水解物浓度组间的方差分析。以３种鱼粉 水解物作为因素，６个浓度梯度作为６个水平，分别进行单因 素方差分析和均值的多重比较。 由表２及图１可以看出，３种鱼粉水解物在不同浓度下 的生根抑制活性均有差异，即随着鱼粉水解物浓度的增加， 其生根抑制活性越强。 尽管以上分析表明不同浓度组间生根抑制活性有差异， 但不能说明任何两两组间都有差异，为了解具体哪两组间有 图１ ３种鱼粉水解物对多年生黑麦草种子生根抑制活性的比较 表３ 不同浓度组间的多重比较 表３中的数值为双尾检验Ｐ值，从其中的Ｐ值可以看 白酶制备的鱼粉水解物抑制率依次达到了１００％、６２、５５％、 出，除碱性蛋白酶制备的鱼粉水解物浓度为１．５与２．０ｍｇ／ｎ￣ ９３．０Ｑ％。 组，风味蛋白酶制备的鱼粉水解物浓度为０．５与１．０ ｍｇ／ｎ￣ ２．１．２ ３种鱼粉水解物间的方差分析。从表中的Ｐ值可以 组、２．０与２．５ ｍｇ／ｎ￣组，复合蛋白酶制备的鱼粉水解物浓度 看出，浓度为Ｏ．５ｍｇ／ｎ￣时，３种鱼粉水解物生根抑制活性组 为１．０与１．５ｍｇ／ｎ￣组、１．５与２．０ｍｇ／ｎ￣组间无显著性差异； 间两两均无显著性差异，且在多肽浓度为１．５、２．Ｏ、２．５ ｍｇ／ｎ￣ 其他各浓度组间均有显著或极显著性差异。 的３个浓度水平下，碱性蛋白酶与复合蛋白酶制备的鱼粉水 ３种鱼粉水解物对多年生黑麦草根系的抑制率的比较 解物组间生根抑制活性也无显著性差异；而碱性蛋白酶和风 （表４）。 味蛋白酶、风味蛋白酶与复合蛋白酶制备的鱼粉水解物在浓 表４ 不同浓度下３种鱼粉水解物对多年 度为１．５、２．Ｏ、２．５ ｍｇ／ｎ￣时生根抑制活性组间存在差异；水 ● 生黑麦草种子生根抑制率的比较 解物浓度为１．０ｍｇ／ｎ￣时，碱性蛋白酶与风味蛋白酶、碱性蛋 白酶与复合蛋白酶、而风味蛋白酶与复合蛋白酶存在差异。 表５ ３种刍粉７ｋ锯物生根抑制活性的多重比较 浓度／／ｍｇ／ｎ￣ 碱性蛋白酶一风味蛋白酶Ｏ．５５３ Ｏ．０２５ Ｏ．００８ Ｏ．０１４ Ｏ．００３ 碱性蛋白酶一复合蛋白酶Ｏ．２３３ Ｏ．０２８ Ｏ．６４４ Ｏ．９３６ ０．３２３ 风味蛋白酶一复合蛋白酶０．０９９ ０．１３０１ ０．００８ ０．０１９ ０．００８ 抑制率（％）＝（对照组根长一处理组根长）／对照组根长 ｘ １１３０％。 综合以上分析表明，随着水解物浓度的增加，３种鱼粉水 表４的数据可以看出３种鱼粉水解物对多年生黑麦草 解物对多年生黑麦草种子生根抑制活性逐渐增强，当水解物 种子的生根抑制活性随着其浓度的增加而增强，其中当水解 （下转第４７０２页） 物浓度达到２．５ ｍｇ／ｎ￣时，碱性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋 维普资讯 http://www.cqvip.com
４７０２ 安徽农业科学 ２ＯＯ６生 其他处理明显低，分别是处理⑤的８７．９１％，处理①（ＣＫ）的 ２３．４８％。ＭＤＡ是膜脂过氧化的有毒代谢产物之一，通常将 它作为膜质过氧化指标，表示细胞膜脂过氧化程度和植物衰 老指标及对逆境条件反应的强弱。由表２可知，锌离子处理 后，ＭＤＡ含量处理④＜处理⑥＜处理⑤＜处理③＜处理②＜ 处理①（ＣＫ），其中处理④ＭＤＡ含量最低，分别是处理⑥的 一种较客观地反应根系生命活动的生理指标。植物根系活 由表２可知，锌离子处理后，根系活力处理④＞处理③ 力是反映植物对于水培条件的适应能力大小的重要指标之 一。＞处理②＞处理⑤＞处理①（ｃＫ）＞处理⑥，其中处理④根系 活力最高，分别是处理①（ＣＫ）的３．ｏ８倍，处理③的１．５７倍。 ３结论 ２９．９１％，处理①（ｃＫ）的１７．３５％。糖类在植物代谢中占有极 重要的地位，是呼吸作用的基质和光合作用贮能的重要形 研究表明，在保证烟草幼苗正常生长的浓度范围内，不 同锌离子浓度处理对烟草幼苗的生长及生理生化指标产生 明显的影响。０．１ ｍｇ／Ｌ锌离子处理的烟草幼苗生长情况较 式。可溶性糖的积累有利于植物抗性的提高，使细胞膜免遭 降解和破坏。由表２可知，锌离子处理后，处理④的可溶性 糖的含量明显高于其他处理，分别是处理⑥的１．２２倍，处理 ①（ＣＫ）的２．０８倍。王淑杰等研究表明，可溶性糖含量与植 好，表现在株高、根冠比等生理指标明显好于其他处理；抗性 生理指标表现在外渗电导率、游离脯氨酸含量及ＭＤＡ含量 ● 物的抗寒性有关。因此，用０．１ ｍｇ／Ｌ Ｚｎ处理后的烟草幼苗 有利于增强其抗寒性。在受到外界环境胁迫后，植物有可能 提高可溶性蛋白质含量，以提高植物自身的抗性。由表２可 知，锌离子处理后，处理④的烟草可溶性蛋白的含量较其他 处理高，分别是处理②的２．０６倍，处理⑤的１．２３倍。根系活 力的大小影响根系对营养物质的吸收及有效物质的形成，是 表２不同锌离子浓度处理对烟草生理生化指标的影响 均低于其他处理，而可溶性糖、可溶性蛋白及根系活力均高 于其他处理。这表明锌营养对于维持自身生理代谢，提高植◆ 物抗性，减少外界不良环境对植物造成的伤害起到一定的促 进作用。 参考文献 ［１］郝建军，刘延吉．植物生理学实验技术［Ｍ］．沈阳：辽宁农业科学技术 出版社，２０ｏ１． ［２］韩冰，郑克宽．镁、锌、硼、锰元素对烤烟产量及质量影响的研究［Ｊ］．内 蒙古农牧学院学报，１９９９，２ｏ（１）：７２—７７． ［３］李华．施锌对马铃薯产量和品质的影响［Ｊ］．山东农业大学学报，１９９７， １７（３）：２７０—２７２． ［４］张福锁．Ｚｎ营养状况对小麦根细胞膜透性的影响［Ｊ］．植物生理学报， １９９２，１８（１）：２４—２８． ［５］王淑杰，王家民，李亚东，等．可溶性全蛋白、可洛｝生糖含量与葡萄抗寒 性关系的研究［Ｊ］．北方园艺，１９９６（２）：１３—１４． ［６］刘国顺，习向银，时向东．锌对烤烟漂浮育苗中烟苗生长及生理特性的 影响＿Ｊ］．河南农业大学学报，２ＯＯ２，３６（１）：ｌ８．２２． ［７］聂新柏，靳志丽．烤烟中微量元素对烤烟生长及产质量的影响［Ｊ］．中 国烟草科学。２００Ｂ（４）：３０—３４． （上接第４６７５页） 化学除草剂和化肥对环境产生的污染，具有良好的经济效 益、生态效益和社会效益。 浓度达到２．５ ｍｇ／ｍｌ时，碱性蛋白酶制备的鱼粉水解物生根 抑制活性强于复合蛋白酶制备的鱼粉水解物，而风味蛋白 酶制备的鱼粉水解物生根抑制活性最弱。在低浓度时，三 者之间的生根抑制活性无显著性差异，而随着浓度的增加， 三者的差异逐渐显著。 ３讨论 参考文献 ｌｌ』ＢＡＬＯＧＨ Ｊ Ｃ，＾ＮＤＥＲｓ０Ｎ Ｊ Ｌ．Ｅｎ￣３５４． ａｌ ｉｍｐａｃｔｓ ０ｆ ｔｕｆｆｇｒａｓｓ ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ ｌＪＪ．Ｇｄｆ Ｃｏｕｒｓｅ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ－Ｅｎｖｉ￣一Ｉｓｓｕｅｓ，１９９２：２２ｌ ［２］李水清，赵春．我国生物除草剂的研究进展［Ｊ］．湖北农学院学报，２０（１３， ｚ３（２）：１３５—１３９． 研究的结果表明，相对于风味蛋白酶制备的鱼粉水解 １３ Ｊ ＬＹＤＯＮ Ｊ，ＤＵＫＥ Ｓ ０．Ｐｒ ｔｏｗａｒｄ ｎａｔｕｒａｌ ｈｅｒｂｉｃｉｄｅｓ ｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ｈｅｒｂｓ ＳｐｉｃｅｓＭｅｄ Ｐｌａｎｔｓ Ｄｉｇ．１９８７。５：ｌ一４． 物，碱性蛋白酶和复合蛋白酶制备的水解物生根抑制活性 要明显更强。所以在以鱼粉作为底物制备除草活性物质时 可以优先选择碱性蛋白酶与复合蛋白酶。 该实验所选用的鱼粉为动物饲料，所用的水解酶为食 品级的蛋白酶，制备过程中加入的少量氨水经过１０ ｒｎｉｎ灭 酶步骤后，经测定各水解物中的氨氮含量均小于１０ ｍｇ／Ｌ， １４Ｊ Ｎ珊ＳＥＮＫＦ，ａ ７叩ＹＴＦ，Ｗ００ＤｓＷＢ． Ｉｈｅｉ姐ｉｌｅｎｅｅ ｅｔ＂ｔｈｅ ｅｘ－ｍｔｅｔ ０ｆ ８ｏｒｎｅ ● ｃｒｏｐｓ ａｎｄ ｓｏｉｌ ｒｅｓｉｄｕｅｓ Ｏｉｌ ｇｅｒｒｒｉｆｉ￣ａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ。ｌ９印．４０：１８８一ｌ９７． ［Ｊ］．Ｃａｎａｄｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ０ｆＰｌａｎｔ １５Ｊ Ｐ删 ＺＡ．Ｐｈｙｔｏｔ￣ｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅ ｄｅｃ∞驸商ｄ∞ｉｎ ｓｏｉｌ ０ｆ ｐｌａｍ ｓｅｓｉｄｕｅｓ［ＪＪ．驯Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｌ９７ｌ，ｌｌｌ：１３一ｌ８． １６Ｊ ＧＩ】Ｅ Ｗ Ｄ，ＭＣＣＡＬＬＡ Ｔ Ｍ，Ｎ（）ＲｓＩｌＡ町Ｆ Ａ．Ｐｒｌｅｓｅｎｅ￣ａｎｄ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ ０ｆ ｉ ｐｈｙｔｏｔ￣ｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｉｎ ｗｈｅａｔ，ｏａｔ，㈣，ａｎｄ ｓｏｒ￣ｕｍ ｒｅｓｉｄｕ￣ｓ［Ｊ］．Ａｇｒｏｎｏｍｙ Ｊｏｕｍａｌ。ｌ９６７．５９：１６３一ｌ６５． １７ Ｊ ＣＨＯＵ Ｃ Ｈ，ＰＡＴＲＩＣＫ Ｚ Ａ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｈｙｔｏｔ￣ｘｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ０ｆ ｃｃｍＤ０Ⅲ出 ｐＨ值在６．８７～７．０５之间，说明这种生根抑制作用不是制备 过程中残留的氨及环境偏碱造成的。因此，天然蛋白原料 水解物可以作为天然萌前除草剂应用在农田，特别是非直 ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｄｕｒｉｎｇ ｄｅｃｏｎ￣ｉｔｉｏｎ ａｆ ｅ（３￣ｎ ａｎｄ ｒｙｅ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｉｎ ｓｏｉｌ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ０ｆ Ｃｈｅｒｒｉｆｃａｌ Ｅｃｏｌｏｇｙ。ｌ９７６，２： 一３８７． １８Ｊ佃忸 眩Ｊ Ｊ，ＳＣＨＵＬＴＺ Ｋ，ＡＮＡＹＡ Ａ Ｌ。ｅｔ ８１．Ａｌｌｄｏｐａｔｈｉｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ￣ｉｒｎｅｎｅｚ 播种子有机蔬菜生产及城市草坪的杂草防治上有着重要的 应用，而且还可以作为兼用作有机肥料，这样可以减少使用 ｅｏｍ ｐｏＨｅｎ［ＪＪ．Ｊｏｕｒｎａｌ ０ｆＣｈｅｍｉ ｃａｌＥｃｏｌｏｇｙ，１９１１３，９：１０１１—１０２５． １９ Ｊ ＣＨＲＩＳｑｌＡＮＳＮＥ．Ｐｒｔ ｌｃｅｗｅｅｄ ｃｏｎｔｒｏｌ ｕｓｉｎｇ㈣ｇｌｕｔｅ． 【Ｐ］．１９９１： ＵＳ Ｐａｔｅｎｔ Ｎｏ．５，０６ｏ．２６８． １１０Ｊ ＣＨＲＩＳＩ／ＡＮＳＮＥ． Ｉｋ ｕｓｅ ０ｆⅢｇｌｕｔｅｎｍｅａｌ ａｓ ａｎａｔｕｒａｌ ｐｒｅ￣ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ ｔｕ］札Ｊｊ．Ｉｎｔ１．Ｔｕｒｆ￣ｓｓ Ｓｏｃ Ｒｅｓ Ｊ，１９９３，７：２８４—２９０． ｃｅｗｅｅｄ
