Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｑｉｑｉｈａｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，２０１０，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．２３ ・技术・方法・ 色谱技术在药学研究方向上的应用 张敏吴小瑜 【摘要】 色谱技术是目前应用最广泛、发展最迅速的生物样品分析测定方法，在制药、精细化工等 领域都涉及相关的应用。本文从药动学、药物在体内的转运、代谢途径、药物相互作用、药物疗效与宏浓 度检测以及体内活性物质监测的研究。 【关键词】 色谱技术 药学ＨＰＬＣ 色谱联用 色谱技术是目前应用最广泛、发展最迅速的生物样品分 践，取决于研究方案和生物样品分析方法的设计和实施，其中 析测定方法，在制药、精细化工等领域都涉及相关的应用。药 生物样品的分析测定方法是最重要环节。药动学包括定量和 学是研究药物在人体内作用规律和人体与药物间相互作用过 定性分析两个方面，色谱技术在这两个方面都发挥了重要的 程的一门交叉学科，阐述药动学、药效学、毒副反应的性质和 作用，根据目的不同选用不同的色谱分析方法。 机制及药物相互作用的规律等；主要任务是一方面通过相关 ｌ＿１ 定量分析通过测定代谢物在体内不同时间的浓度来 研究，对新药的有效性与安全性进行科学评价；另一方面监察 建立反应药物变化规律的数学模型，计算各种药动学参数。 上市后药物不良反应，保障用药安全。色谱技术是药学研究 在定量分析中色谱技术的主要任务是测定血浆和尿液中的药 中最基本、最重要的技术，其广泛应用主要体现在以下几个方 物及其代谢产物的浓度。这其中以高效液相色谱法（ＨＰＬＣ） 面。 和液质联用技术应用最为广泛。很多文献也证实ＨＰＬＣ已成 １ 色谱技术在药动学方面的应用 为一种监测血药浓度及药物在体内代谢过程的较为成熟的方 药动学（ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ，Ｐ Ｋ）在临床药理、药物作用机 法。ＣｓＡ是一种常用的细胞毒类药物，目前，肝、肾移植应用 制以及新药开发等方面的研究中越来越显示出其重要性和必 很普遍。有资料表明，ＣｓＡ应用于肾移植后手术成功率平均 要性。目前世界各大制药公司在新药筛选阶段即考虑候选物 提高近４ｏ ，证明能有效地改善肾移植的效果。ＨＰＬＣ法样 的药动学特性，决定是否进一步开发。药动学的实验基本过 品处理步骤简便、灵敏度高、准确性好、价格合理，结果不受代 程为：给药一取血或组织样品一样品处理与分析测定一数据 谢物的影响，并且与药理效应之间具有更好的效关系，故对患 处理。药物代谢动力学研究获得的资料最终能否用于临床实 者全血药物浓度监测有较强实用性。李楚云等建立了ＨＰＬＣ 一固相萃取测定全血浓度的方法，不仅适用于临床药物监测， 作者单位：无锡卫生高等职业技术学校（江苏） 而且对药动学、生物利用度及药物剂型的改进都有重要意 邮 编２１４０００ 收稿日期２０１０—１１—０８ 义Ⅲ。药物在临床前研究阶段就应在实验动物体内测定各项 张，排出胚胎。米索前列醇有收缩子宫肌层，促使胚囊和蜕膜 免大出血。若出血不多，可采用中药党参、阿胶、炒白术、枳 排出官腔的作用。两药合用可使子宫蜕膜剥离，使胚囊无法 壳、茯苓、桃仁、红花、白及、益母草、侧柏叶、炮姜等３剂连服 存活，妊娠终止，随蜕膜排出官腔，让药物流产趋于完善。使 ３天，每天１剂。有少部分患者药物流产后Ｂ超可见卵巢增 用米非司酮加米索前列醇片流产后，未见胚囊组织排出者，应 大或并发卵巢黄素囊肿，大小为５ ｃｍ以内，一般无需特殊处 特别警惕异位妊娠的可能性。因此，最后服药前进行常规Ｂ 理，可严密观察半年，大多数可自行消退，若继续增大可用中 超，以确定宫内妊娠及核实妊娠天数，才能增加用药的完全 药及对症处理。本组曾发现５例药流后卵巢囊肿大小为４～ 性。本组２１９例完全流产率达９４．５２ ，与用药前后常规Ｂ ５ ｃｍ，但半年后自行消失，１例经给予中药服用半个月后也逐 超有很大的帮助。对孕囊大小的判断依靠Ｂ超确定，所测得 渐消失。 的孕囊内径测值也为服药的选择及预后有一定的关系。孕囊 从本组资料认为，米非司酮加米索前列醇的药物流产术 平均内径≥３５ ｍｍ者，流产成功率低，若首次用药失败后可加 用于终止早孕可为妇女避孕失败后而害怕手术的补救措施， 服一定剂量的米非司酮及米索前列醇可使流产成功率提高。 只要掌握好适应症，结合Ｂ超严密观察并做适应处理，应是 米非司酮流产效果与停经天数有关。妊娠后体内孕激素水平 较为安全有效的。 随妊娠天数增加而逐渐增多，妊娠天数越短，孕激素水平越 参 考 文 献 低，妊娠１周内孕酮主要由卵巢妊娠黄体产生，故在此期间米 ［１］ 孟瑜，方爱华．药物流产及其临床应用ＥＪ］．中国实用妇科与产科 非司酮的抗孕效果最佳，本组妊娠≤３５天者完全流产率达 杂志，２００９，２５（１Ｏ）：７３８—７４２ １００ 。药物流产后阴道持续流血是临床医生及患者十分关 ［２］杨国卿．Ｂ超对１３Ｏ例药物流产观察分析广Ｊ］．中国超声医学杂 心的问题，多因流产不全，子宫残留蜕膜组织所致。有报 志，１９９８，１４（９）：４６ 道Ｉ 。］，多次做过人工流产或剖宫产其子宫内膜损伤，部分有瘢 ［３］常洪晶，秦王燕，杨玉英，等．超声观察药物不全流产的影响因素 痕形成或有官腔感染、粘连等，应用药物助产可使部分绒毛、 ［Ｊ］．中国超声诊断杂志，２００１，２（９）：５３—５６ 蜕膜组织粘连剥离不全，致使其残留，导致出血时间长，若出 血时间长，出血量多于月经量的２倍。应果断采取清官术，避 齐齐哈尔医学院学报２０１０年第３ｌ卷第；曼—塑 药动学参数，如在１４，Ｉ）ＣＰ的临床前研究中，用ＨＰＩ Ｃ法检测 大鼠血浆、尿液及粪便中药物及其代谢产物的浓度，发现其约 ５Ｏ 的药物通过肾脏排泄，约１５ 经粪便排出 】。进行Ｉ期 ｌ临床试验的药物也应检测其在人体内的各项药动学参数。 如：拓扑酶Ｉ，Ⅱ抑制剂ＸＲ１１５７６的Ｉ期临床研究，应用 ＨＰＬＣ法测定了ＸＲ１ １５７６的药动学参数，对ＸＲ１１５７６的进 一究。 ２．２在药物代谢中的应用 大部分药物在体内都要经代谢 后排泄。参与药物代谢的酶分２大类：Ｉ相氧化酶和Ⅱ相结 合酶。无活性的代谢产物直接从体内排泄，而有活性的代谢 产物在与由同种酶代谢的药物合用时会发生竞争抑制作用， 因此非常有必要将药物在体内的代澍途径研究清楚。明确的 药物代谢途径也是药物上市和指导临床应用所必需。色谱技 步研究以及Ⅱ，Ⅲ期临床有重要的指导作用 ］。Ｄ一２４８５１ 是一种微管蛋白抑制剂，Ｓｔｏｋｖｉｓ等也建立了液质联用方法测 定其血浆和尿液中药物浓度。 １．２ 定性分析 色谱技术在定性药动学中的任务主要是分 术不仅可以分析药物母药以及代谢产物的浓度，还可以分析 未知物质是否是药物的代谢产物。目前对药物代谢途径的研 究主要有两种方法：一是重组酶与研究药物孵育，用色谱技术 析确定甚至提纯药物代谢产物。大多数药物在体内经生物转 化成其代谢产物而排出体外，对药物代谢产物的研究主要是 确定药物在体内的代谢产物。现在对药物代谢产物的鉴定方 法主要为分辨率高的质谱方法，通过确定其相对分子质量，进 而推测其代谢产物发生了何种基团的改变。质谱作为一种常 测定药物代谢产物浓度，推定何种酶参与药物代谢；二是抑制 实验，用已知酶的底物与研究药物孵育，测定研究药物及代谢 产物浓度是否因加入酶的底物而抑制，从而推断研究药物的 代谢途径。 ３色谱技术在药物相互作用中的应用 用的分析技术，有高灵敏度、高鉴别力，并能与其他分离、分析 手段等相互兼容，成为促进多学科研究的重要手段当前报道 目前由于药物种类日益增多，临床合并用药的治疗和种 类也越来越多，由药物相互作用所带来的问题特别是药物不 良反应问题愈来愈引起人们的关注。色谱技术是研究药动学 方面药物相互作用，并将其应用至临床的重要技术。通过运 用色谱技术对其中一种药物浓度进行定量分析，了解药物之 间的相互作用，可为临床联合用药的合理性提供指导。也可 以对一些治疗窗非常窄的药在合并用药时监测其血药浓度。 他汀类药物是目前；临床上最常用的降脂药之～，但该药 对于高三酸甘油血症和低高密度脂蛋胆固醇血症并不理想， 较多的质谱与色谱的联用技术，包括ＬＣ—ＭＳ、Ｇｃ—ＭＳ等． ＧＣ—ＭＳ是应用最多、最成熟的一种方法，ＧＣ—ＭＳ与传统 薄层色谱、气相色谱相比，样品处理简单快捷，灵敏度高，重复 性好，因其自身可对成分进行定性分析，所以无需大量的对照 品。环磷酰胺（ｃＴｘ）目前广泛应用于各种肿瘤化疗，主要毒 副反应是骨髓抑制及对肾脏和膀胧的损害，因此，非常有必要 在治疗过程中监测其血药浓度。Ｃ＇Ｉ、Ｘ的血药浓度测定以 ＨＰＩ Ｃ法灵敏度最高，但也有与ＭＳ联用的报道等。用 ＨＰＬＣ～ＭＳ法对肾功能不全患者进行药动学研究，发现患者 血液和尿液ＣＴＸ清除率显著降低，导致血药浓度升高，而透 析患者则变化不大。提示应该通过监测的血药浓度进行疗效 因此在治疗混合性高脂血症时，往往需要联合贝特类降脂药。 他汀类药物在临床应用中出现的最严重不良反应是横纹肌溶 解，肌病发生的危险与其使用剂量和血药浓度呈正相关。许 多临床研究发现，联用贝特类药物可以增加使用他汀类药物 察、判断预后，并结合患者的病情制定最佳治疗方案。因此， 测定ＣＴＸ的血药浓度，掌握患者间的个体差异有重要的临床 意义和研究价值。 ２色谱技术在药物转运、代谢研究中的应用 患者的横纹肌溶解发生率。目前普遍认为，这主要是由于两 者在药动学方面的相互作用引起的。Ｂａｃｋ—ｍａｌｌ等［６］对健康 人群吉非贝齐、西立代他汀药动学影响进行了研究，采用随机 双盲交叉设计，１Ｏ例健康受试者口服６００ ｍｇ吉非贝齐或安 慰剂３ ｄ，于３ ｄ晨起顿服０．３ ｍｇ西立伐他汀回次，分别采用 Ｌｃ—ＭＳ和ＨＰＬＣ法测定西立伐他汀和吉非贝齐浓度，结果 显示吉非贝齐使西立伐他汀ＡＵＣＯ。增加５５．９ ，血浆峰浓 ２．１在药物转运中的应用 药物的吸收、分布、代谢以及排 泄过程都需要通过各种细胞膜，药物通过细胞膜的方式有：滤 过、简单扩散、载体转运。许多亲水性药物通过细胞膜需要载 体蛋白的参与，转运蛋白的功能会影响到药物的吸收及排泄， 进而影响药物的血药浓度及效应，并且由相同转运蛋白转运 的药物也可发生竞争性抑制，从而影响转运。因此，对药物转 运途径的研究有重要意义。色谱技术可通过检测血浆及尿液 度增加３０．７ ，Ｍ一２３（吉非贝齐代谢产物）ＡＵＣ降低２２ 。 表明在健康受试者体内，吉非贝齐可使西立伐他订血药浓度 增加，可能是由于吉非贝齐抑制了西立伐他汀代谢酶 ＣＹＰＺＣＳ的缘故，这就大大增加了患者发生肌病的危险性，因 此在临床联用两药时需谨慎，治疗中必须密切监测患者的肝 。肾功能、肌肉症状和肌酶谱的变化。 中药物浓度，探索参与特定药物在体内转运的蛋白。Ｚｈｏｕ 等…建立了ＨＰＩ，Ｃ法测定Ｃａｃｏ细胞系中ＤＭＸＡＡ（一种细 胞生长因子）及其葡萄糖醛酸代谢产物，因为ＤＭＸＡＡ由 ＭＲＰ２转运作转运，通过加入细胞中的药物对ＤＭＸＡＡ及代 谢产物的浓度的影响可推测药物的转运途径。郭瑞臣等 应 用ＨＰＬｃ—ＥｓＩ—ＭＳＤ测定了尼素地平人体中的血浆浓度及 药代动力学。由于该药治疗高血压心脏病的作用Ｈ一硝苯 地平强４～１Ｏ倍。但给药剂量小，遇光不稳定，因此，用常规 ＵＶ检测达不到要求，而本法灵敏度高，最低检出限为０．１５ ４ 色谱技术在药物疗效与药物浓度监测中的作用 血药浓度和药物的药理作用强度之间有密切关系，通常 用血药浓度来表示药物在体内的浓度。对于临床常见的一些 治疗窗较窄的药物，应进行药物浓度监测。治疗药物监测 （ｔｈｅｒａＰｅｕｔｉｃ ｄｒｕｇ ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ，ＴＤＭ）是指在临床进行药物治 疗过程中，观察药物疗效的同时，定时采集患者的血液（或尿 液、唾液等），测定其药物浓度，以便根据患者的具体情况，使 给药方案个体化，从而达到满意的疗效及避免发生不良反应， ｎｇ／ｍｌ，不仅满足了低浓度检测，亦可用于生物利用度的研 ！ ！ ！ ！—Ｑｉｑ—ｉｈａ…ｒ Ｍ～ｅｄ ！ 同时也可以为药物过量中毒的诊断和处理提供有价值的实验 室依据，将临床用药从传统的经验模式提高到比较科学的水 平。色谱技术以其灵敏度高、简便快捷成为目前血药浓度监 测最常用的方法之一。对于血药浓度与药效关系密切、治疗 ！！！墨！！ ０＿ Ｉ． Ｎｏ．２３ 的重要原因。刘建芳等嘲采用ＡｇｉｌｅｎｔｌｌＯＯＬＣ／ＥＳＩ２ＭｓＤ联 用系统，内标挂利嗪，流动相：甲醇＿－水（７０：３０）含ｌ％甲 酸，流速０．４ ｍｌ／ ｒｎｉｎ，检测离子为４０５．２ Ｍ／Ｚ和３６９．２ ＳＩＭ 等条件，建立了测定人血浆中的氟桂利嗪。样品用乙醚一环 指数低、毒性反应强等药物（地高辛、茶碱）需要进行药物浓度 己烷（２：１）提取，可去除血浆中内源性物质的干扰。方法灵 敏专一，最低检测限为０．２ ｎｇ／ｍｌ，适于生物样品分析。经２Ｏ 名健康受试者交叉口服单剂量二种盐酸氟桂利嗪胶囊２ｏ ｍｇ，测得血药浓度一时间曲线及动力学参数，结果满意。 Ｅ＿｛前，科学技术正以日新月异的速度飞速发展，新技术的 监测。随着ＨＰＩ Ｃ、ＧＣ—ＭＳ联用和Ｉ Ｃ—ＭＳ联用的发展， 特别是ＨＰＩ Ｃ在ＴＤＭ中使用较广，他可测定除地高辛、钾盐 少数几个药以外的大部分药品，价格相对便宜且干扰小，还可 测定代谢物，在体内药物监测中发挥着重要的作用。环抱素 Ａ（ＣＳＡ具有选择性的免疫抑制作用，可有效地抑制器官移植 产生、仪器设备的更新较快。综上所述，色谱学的发展为药学 术后的排斥反应，明显提高移植器官和组织的存活率。由于 ＣＳＡ安全范围窄，且具有高度变化的药动学参数，加上不良 反应（如肾功能损害、胃肠道反应）明显，在临床应用中应进行 药物浓度监测。ＣＳＡ血药浓度监测对排斥或中毒反应发生 前后的鉴别具有重要意义。尚刚伟等ｌ＿７＝。建立了一种改良萃取 一高效液相色谱法测定全血中ＣＳＡ浓度，研究亲代活体肝移 植术后某患儿全血中ＣＳＡ浓度的早期变化及影响因素。 ５色谱技求在体内活性物质检测中的应用 人体内天然存在一些具有生理功能和生物学活性的物 质，在正常生理过程和病理过程中对机体起着重要的调节作 用，这些内源性活性化合物往往浓度很低，因此测定方法必须 具有高灵敏性。常用的方法有色谱法和免疫分析法，色谱法 特别是ＭＳ以其检测方法灵敏、快速等优点越来越受到青睐。 色谱法通过在线分离、分析，将目标内源性活性物质与其他内 源性干扰物质分离，再通过多样化的检测手段进行定量，其特 异性强（抗干扰能力强）、准确度高。 ２０世纪５Ｏ年代以来，合成类固醇的使用已是滥用兴奋 剂药物之首。外源性类固醇激素的检测方法已经较为成熟， 以检测代谢产物为主。现在有些运动员为了逃避兴奋剂的检 查而越来越多地使用内源性类固醇激素制剂。内源性类固醇 激素（包括事酮、双红星酮、表率酮、脱氢表雄酮、雄烯二酮等） 在人体自身也会分泌，因此不能再使用定性的方法进行检测。 一般而言，人体中内源性类固醇激素的浓度个体差异较 大，而一些内源性类固醇激素的浓度比值较为稳定。服用内 源性类固醇激素可使人尿中该种类固醇及／或其代谢产物浓 度发生变化，当尿中这些类固醇浓度及／或其比值超出正常范 围时，可怀疑尿样是否为兴奋剂阳性。 以ＨＰＩ Ｃ法，采用ＴＳＫＧ３０００ＳＷ分子筛色谱柱（分子量 范围１ ０００～３００ ０００），流动相为２ ｍｏｌ・Ｌ 尿素，流速１ｍｌ／ ａｒｉｎ，检测波长２１６ ｎｍ，对男性精液生殖细胞精蛋白进行了分 离研究，结果首次证实了精蛋白异常或含量不足是男性不育 研究提供了先进的手段与技术，在ｌ临床药理领域中的应用非 常广泛。他能用于药品的含量测定和杂质限度检查，还能用 于药物生物等效性和生物利用度及药代学研究，从而能够更 多地排除主、客观因素影响，使对药物的评价更加客观、准确。 参 考 文 献 ［１］Ｇｕｎｎａｒ Ｈ，Ｍａｔｔｈｉａｓ，Ｕｒｂａｎ，ｅｔ ａ１．Ｎｏ ｒｉｓｅ ｉｎ ｒｅｎａｌ Ｄｏｐｐｌｅｒ ｒｅｓｉ— ｓｅｔａｎｃｅ ｉｎ—ｄｉｃｅｓ ａｔ ｐｅａｋ ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ Ａ ｉｎ ｓｔａｂｌｅ ｋｉｄｎｅｙ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｎｅｐｈｒｏｌ［Ｊ］．Ｄｉａｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ：Ａｕｇ， ２００３，１８：１ ６３９—１ ６４３ ［２］ Ｂａｒｒｅｌｓ ＭＪ，Ｈａｎｓｅｎ ＳＣ，Ｔｈｏｒｎｔｏｎ ＣＭ，ｅｔ ａ１．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｏｆ １４Ｃ一１，３～ｄｉｃｈｌ０ｒ０ｐｒ０ｐｅｎｅ ｉｎ ｔｈｅ Ｆｉｓｃｈｅｒ ３４４ ｒａｔ ａｎｄ ｔｈｅ Ｂ６Ｃ３Ｆ１ ｍｏｕｓｅ［Ｊ］．Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃａ，２００４，３４（２）： ｌ９２—１９３ ［３］Ｄｅ Ｊｏｎｇｅ ＭＪ，Ｋａｙｅ Ｓ，Ｖｅｒｗｅｉｊ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｐｈａｓｅ Ｉ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏ— ｋｉｎｅｙｉｃ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ＸＲ１ １５７６，ａｎ ｏｒａｌ ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ Ｉ ａｎｄ ｌＩ ｉｎ— ｈｉｂｉｔｏｒ．ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ ｏｎ ｄａｙｓ １—５ ｏｆ ａ ３一ｗｅｅｋｌｙ ｃｙｃｌｅ ｉｎ ｐａ— ｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｄｖａｎｃｅｄ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｒ［Ｊ］．Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，２００４，９１（８）：１ ４５９—１ ４６５ ［４３ Ａｌｂｕ Ｆ，Ｇｅｏｒｇｉｔａ Ｃ，Ｄａｖｉｄ Ｖ，ｅｔ ａ１．ＩＡｑｕｉｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ— ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ ｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａ— ｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｄａｐａｍｉｄｅ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ｆｏｒ ｓｉｎｇｌｅ／ｎｍｈｉｏｌ ｄｏｓｅ ｂｉｏｅｑｕｉｖａ— ｌｅｎｃｅ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｆｏｒＴＩＩＩ】１ａｔ｜（）｜ｌ［Ｊ］．Ｊ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ Ｂ Ａ ｎａｌｙｔ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｍｅｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ。２００５，８１６（１—２）：３５—４０ ［５］郭瑞臣，魏春敏，王本杰，等．高效液相色谱一质谱联用测定人 体尼索地平血浆浓度及其药动学研究［Ｊ］．药物分析杂志， ２００３，２３（６）：４６４ ［６］ Ｂａｃｋｍａｎ ＪＴ，Ｋｙｒｋｌｕｎｄ ｃ，Ｎｅｕｖｏｎｅｎ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｇｅｍｆｉｂｒｏｚｉｌ ｇｒｅａｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｐｌａｓｍａ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｉｎｔｉｏｎｓ ｏｆ ｃｅｒｉｖａｓｔａｔｉｎ［Ｊ］． Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ，２００２，７２（６）：６５８…６９１ ［７］ 尚伟刚，蒋兴培．改良萃取一效液相色谱法监测亲代活体肝移植 患者全血中ＣｓＡ［Ｊ］．第四军医大学学报，１９９８，１９（２）：２２３—２２６ ［８］刘建芳，杨汉煜，邓呜，等．液相色谱一质谱联用法测定人血浆 中氟桂利嗪［Ｊ］．药物分析杂志，２００３，２３（６）：４６８
