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盾叶秋海棠药材镇痛及抗凝血作用的初步实验研究

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西北药学杂志2012年6月 第27卷第3期 229 tioxidant effects of extracts from Potentilla discolor 作者不断地努力与探索。 参考文献: [13李沛霖,杨锐,周勇,等.糖尿病肾病患者糖化血清蛋 白测定的意义[J].南方医科大学学报,2011,31(6): 1093-1094. Bunge on diabetic rats induced by high fat diet and streptozotocin[J].J Ethnopharmacol,2010,132(2): 518-524.  aIJ In vivo visualization [7] Fang L,Green SR,Baek JS,etand attenuation of oxidized lipid accumulation in hyper- [2]林景涛,翟锬,代艳杰,等.高脂血对血清酶类活性测 定影响及处理方法[J].检验医学与临床,2010,7(15): 1542-1545. cholesterolemic zebrafish[J].J Clin Invest,2011,121 (12):4861—4869. [3]张妍,李君,李津鸿,等.高脂血清对胰岛素测定的影 lon DM,Gersh BJ.Contr0versies in the [8] 0pie LH,Yel响及处理方法[J].天津医科大学学报,2008,14(4): 566—567. cardiovascular management of type 2 diabetes[J]. Hcart,2011,97(1):6-14. [4]崔国利,周奎臣,杨丽结,等.干、湿化学法在乳糜血中的 应用比较[J].中国微生态学杂志,2010,22(1):71—72. [5]熊俊,石文静,冈全忠.磷钨酸一镁一PEG法消除脂血干 扰的方法学评估[J].现代检验医学杂志,2008,23 (1):50—52. [9] Jenkins DJ,Kendall CW,Marchie A,et a1.Effect of almonds on insulin secretion and insulin resistance in nondiabetic hyperlipidemic subiects:a randomized con— trolled crossover trial[J].Metabolism,2008,57(7): 882-887. -I6]Zhang L,Yang J,Chen XQ,et a1.Antidiabetic and an一 (收稿日期:2012-02-24) 盾叶秋海棠药材镇痛及抗凝血作用的初步实验研究 肖 莉 ,蒋佳雯。,杨 亮。,徐文芬 ,黄勇其。 (1.贵州省黔西南州食品药品检验所,兴义562400;2.贵阳中医学院,贵阳 550002) 摘要:目的 观察盾叶秋海棠根茎乙醇提取物(ALE)和水提取物(AQE)的镇痛、抗凝血作用及其急性毒性 方法 采用小鼠扭 体法、热板法及断尾出血时间(BT)、最大耐受量(MTD)测定法。结果 不同剂量的AI E能明显减少醋酸致小鼠扭体次数及延 长热板致痛的潜伏期;ALE大剂量时能明显延长小鼠BT。ALE和AQE小鼠口服MTD为3.865和7.175 g・kg (相当于干 燥原生药5O g・kgI1),12 h内,共3次。结论ALE和AQE的急性毒性均较小。 doi:10.3969/j.issn.1004—2407.2012.03.017 盾叶秋海棠根茎的ALE具有显著的镇痛及抗凝血作用,且盾叶秋海棠根茎的 关键词:盾叶秋海棠药材;镇痛;抗凝血;急性毒性 中图分类号:R965 文献标志码:A 文章编号:1004—2407(2012 J03-0229—03 Study on the analgesic and arresting bleeding effects of Begonia cavalerei herb from IjUIZn0U DrOVlnce XIA0 Li .JIANG Jiawen 。YANG Liang ,XU Wenfen。,HUANG Yongqi (1.Qian Xinan Zhou Food and Drug Inspection Office in Guizhou Province。Xingyi 562400。China;2.Guiyang College of Traditional Chinese Medicine。Guiyang 550002。China) Abstract:Objective To observe the analgesic and antic0agulative effects of alcoholic extract(ALE)and the aqueous extract(AQE) 0f rhizome of Begonia cavalerei herb from Guizhou province。and to determine the acute toxicity of the extracts.Methods The in— dexes were tested as follows:writhes of abdominal cavity on mice caused by ip of acetic acid-the incubation of pain induced by heated plate stimulation in mice。bleeding time(BT)by cutting the mouse s tail and the maximal tolerance dose(MTD).Results ALE could obviously decrease the numbers of writhe and prolong the incubation of pain of mice.AI E could obviously shorten BT of mice.MTD of AQE for mice was 7.175 g・kg and that of ALE was 3.865 g・kg by ig three times in 12 h(be equal to 3X 50 g・kg一 of dried herbs in 1 2 h).Conclusion The pharmacological basis of ALE of rhizome of Begonia cavalerei herb on analgesia and anticoaguIation are proved.The acute toxicity of ALE and AQE of rhizome of Begonia cavalerei herb is slight. Key words:Begonia cavalerei herb;analgesia;anticoagulation;acute toxicity 秋海棠科植物盾叶秋海棠Begonia cavalerei L6v1.以新鲜或干燥根茎人药,具有散瘀止痛等功效, 糖等化学成分 ]。盾叶秋海棠在贵州民间常用于治 疗跌打损伤等,疗效良好。笔者根据其功效主治对黔 产盾叶秋海棠干燥根茎的乙醇提取物(ALE)和水提 取物(AQE)的镇痛、抗凝血作用及其急性毒性进行 了初步实验研究,现报道如下。 1仪器与材料 用于痛经、闭经、跌扑肿痛等,是贵州省少数民族常用 药Ⅲ。查阅有关文献资料,其同属植物根茎中主要含 有强心苷、黄酮类、鞣质、三萜类、皂苷类、谷甾醇及多 基金项目:国家自然科学基金项目(编号:30660224) 作者简介:肖莉,女,主任药师 通信作者:黄勇其,男,副教授 1.1 仪器 AG135型电子天平(瑞士Mettler-Tole- d0公司);GJ一8402型(55.0±0.2℃)热板测痛仪(浙 http://XBYZ.cbpt.cnki.net 230 西北药学杂志2012年6月 第27卷第3期 江宁海白石电子医药仪器厂)。 1.2动物 昆明种小白鼠,清洁级,由贵阳医学院实 验动物中心提供,合格证号:ScxK(黔)2002-0001。 1.3试药供试药材采自贵阳市鬼架桥,经贵阳中 医学院何顺志教授鉴定为盾叶秋海棠B.cavalerei L6v1.的根茎,晒干备用。 统计学处理方法同2.1.1项下。结果为ALE 高、低剂量均能明显延长小鼠痛阈值,而AQE则无 明显作用。见表2。 表1盾叶秋海棠根茎的ALE和AQE对醋酸致小鼠扭体的 影响( 士s。,l=10) Tab.1 Effect of ALE and AQE of rhizome of Begonia cavalerei on writhes of abdominal cavity on mice caused by ip of 乙醇提取物(ALE)ET]:将供试药材粉碎成粗粉, 50℃干燥,取1 500 g,置圆底烧瓶中,用无水乙醇 (为药材量的4倍)回流提取4次,每次4 h,过滤,合 并滤液,减压回收溶剂至近干,再经6O℃真空干燥后 acetic acid( 士s。n=10) 得ALE干浸膏(提取收率为7.73 )。临用时配制 成一定质量浓度的含4 mL・L_。Tween-80的水混 悬液。 注:与对照组比较 <O.05, <0.01 水提取物(AQE) ]:将乙醇提取后的药渣在室 温下挥干溶剂至无乙醇味,取1 300 g置圆底烧瓶 表2盾叶秋海棠根茎的ALE和AQE对小鼠热致痛反应的 影响( ± 。n ̄--10) Tab.2 Effect of ALE and AQE of rhizome of Begonia cavalerei on pain by heat stimulation on mice(x-t-s。,l 10) 中,用蒸馏水(用量为药渣量的4倍)回流提取4次, 每次4 h,过滤,合并滤液,浓缩滤液至近于,再经6O℃ 真空干燥后得AQE干浸膏(提取收率为14.35 )。临 用时配制成一定质量浓度的含4 mL・L Tween-80 的水溶液。 实验给药剂量按干燥原生药量计算。 2方法 与结果 2.1 对小鼠痛反应的影响 注:与对照组比较 <O.05,。 <0.01;给药前后比较 P<O.05 2.1.1对醋酸致扭体反应的影响 取小白鼠,雌雄 各半,18 ̄22 g,随机分为5组,每组10只,各组分别 按表1中的剂量以相应试药按0.02 mL・g ig给 药,1 d 2次,连续2 d,对照组给等容量4 g・L Tween一80水溶液;末次给药后45 rain,每只小鼠ip 7 2.2 对小鼠断尾出血时间的影响 取小白鼠,雌雄 各半,18 ̄22 g,分组同2.1.1项下,各组按表3中的 剂量以相应试药按0.01 mL・g ig给药,1 d 2次, 连续5 d,第6 d给药1次后1 h,按文献[8]方法操作, 计算各组小鼠断尾出血时间(BT)。 统计学处理方法同2.1.1。结果为ALE高剂量 能显著延长BT,而ALE低剂量和AQE则无明显作 用。见表3。 表3盾叶秋海棠根茎的ALE和AQE对小鼠断尾出血时间 (BT)的影响( 士s,n=10) Tab.3 Effect of ALE and AQE of rhizome of Begonia cavalerei mI ・L 冰醋酸水溶液0.2 mL,观察小鼠在15 rnin 内的扭体次数,并计算扭体抑制率。 扭体抑制率( )一[(对照组扭体次数一给药组 扭体次数)/对照组扭体次数]×100 。数据处理均 采用SPSSIO.0 for Windows统计分析软件,2组之 间的比较用Dunnett t检验。结果为ALE高、低剂 量均具有明显减少小鼠扭体次数作用,而AQE则无 明显减少小鼠扭体次数作用。见表1。 2.1.2对热致痛反应的影响 取雌性小白鼠,18~ on bleeding time(BT)by cutting the mouse S tail( 士S, n 10、 22 g,用热板测痛仪,按文献[8 方法预选出合格小鼠 (55.0土0.2)℃时30 S内舔后足,随机分成5组,每 组1O只,各组小鼠测定给药前基础痛阈值,然后各组 分别按表2中的剂量以相应试药按0.02 mL・g ig 给药,对照组同2.1.1项下,1 d 2次,连续2 d,末次 注:与对照组比较 <O.01 2.3急性毒性实验~取小白鼠60只,雌雄各半,18 给药后1 h,测定各组小鼠给药后痛阈值(超过60 S 的按60 s计),以给药组与对照组进行组间比较,与 给药前后进行组内比较。 给药前后阈提高率( )一[(给药后痛阈值一给 药前痛阈值)/给药前痛阈值]×100 。 22 g,随机均分为3组,分别以NS、ALE和AQE 按0.03 mL・g ig(提取物给药剂量为干燥原生药 50 g・kg~,相当于AI 3.865 g・kg 和AQE 7.175 g・kg~,供试药液达最大可配制质量浓度),12 h 内,共3次;观察7 d,动物全部存活;第8 d处死全部 http://XBYZ.cbpt.cnki.net 西北药学杂志2012年6月 第27卷第3期 231 动物,解剖,肉眼观察未发现NS组与ALE和AQE 量浓度较大所致。盾叶秋海棠干燥原生药的临床人 组动物内脏器官有明显差异。但在第2天,与NS组 口服剂量为干燥原生药15 g・d-1[ ,小鼠平均体质 比较,给药组少数动物出现活动减少、食量减少的不 量以2O g计,人平均体质量以6O kg计,计算出小鼠 良反应,第3天恢复正常。 ig给药的MTD相当于临床人口服剂量的200倍以 3小结与讨论 上,说明ALE和AQE短期口服给药安全范围较大。 3.1 镇痛和抗凝血作用 实验结果显示:以ALE 参考文献: 0.773和0.387 g・kg 剂量(相当于干燥原生药10 [1]贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量 和5 g・kg )ig给药,对不同的致痛模型均具有明显 标准Is].贵州:贵州科技出版社,2003:186. 对抗作用,说明盾叶秋海棠根茎具有镇痛作用,且大剂 [2] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草:第5 量较小剂量作用明显,提示成分可被乙醇提取;0.773 册:第13分卷[M].上海:上海科学技术出版社,1999: 490-502. g・kg ALE可显著延长小鼠出血时间,说明盾叶秋 [3]贾敏如,李星炜.中国民族药志要[M].北京:中国医药 海棠根茎具有抗凝血作用;并提示其镇痛及抗凝血活 科技出版社,2005:86—88. 性成分均可被乙醇提取,作用机制有待进一步研究。 [4]张嘉岷,陈耀祖.秋海棠化学成分的研究I-J].中国中药 另外,AQE是用乙醇提取后的药渣提取的,故 杂志,1997,22(5):295—296. AQE无明显镇痛和抗凝血作用,尚不能确定镇痛和 [5]吴家红,徐文芬,文雯,等.HPLC法测定秋海棠属药材 抗凝血活性成分不可被水提取,即其活性成分是否为 中 谷甾醇的含量[J].微量元素与健康研究,2009,26 (6):24-26. 醇溶和水溶交叉化学部位有待进一步研究。 [6]蒋佳雯,徐文芬,杨亮,等.秋海棠药材的质量标准研究 3.2 急性毒性 ALE和AQE以ig给药,12 h 1次, [J].中国实验方剂学,2011,17(1):40—42. MTD分别为3×3.865 g・kg 和3×7.175 g・kg [73 中国科学院上海药物研究所.中草药有效成分提取与分 [相当于干燥原生药3×5O g・kg_。,12 h 1次]。该 离[M].上海:上海科学技术出版社,1983:7. 大剂量给药后,第2天给药组少数动物出现活动减 [83李仪奎.中药药理实验方法学[M].2版.上海:上海科 学技术出版社,2006:241—687. 少、食量减少的不良反应,可能是由于所给药液的质 (收稿日期:201卜11-30) 胰岛素与硒联合应用治疗糖尿病大鼠的可行性分析 徐天娇 ,袁秉祥 ,刘 勇。(1.西安医学院药理与毒理学教研室,西安710021;2.西安交通大学医学院药理系,西安 710061;3.中铁二十局中心医院脑血管七科,咸阳712000) 摘要:目的 确定胰岛素和硒联合应用治疗糖尿病大鼠的可行性。方法 建立糖尿病模型,胰岛素皮下注射给药,亚硒酸钠口服 给药。胰岛素和亚硒酸钠分别设计2个剂量(胰岛素;1和0.5 U・kg~;亚硒酸钠:180和6O ・kg )。按2因素2水平的k(2 ),运 用正交实验设计确定胰岛素和硒联合应用的合理配比剂量。结果胰岛素与亚硒酸钠对糖尿病大鼠血糖的降低作用存在相互 影响,胰岛素和硒联合应用的合理配比剂量是1 U・kg :18O g・kg-。。结论 胰岛素和硒联合应用在降低血糖方面明显优 于单用相同剂量的胰岛素或亚硒酸钠,联合用药(胰岛素+硒)发挥了协同作用。 关键词:胰岛素;亚硒酸钠;糖尿病大鼠;血糖 doi:10.3969/j.issn.1004—2407.2012.03.018 中图分类号:R965 文献标志码:A 文章编号:1004—2407(2012)03-0231—03 Feasibility analysis of insulin and selenium combined application in the treatment of diabetes rat XU Tianjiao ,YUAN Bingxiang ,LIU Yong。(1.Department of Pharmacology,Xi an Medical UniversitytXi an 710021-China;2. Department of Pharmacology,School of Medicine,Xi an Jiaotong University,Xi an 710061,China;3.Cental Hospital of Roadway。 China Roadway 20 Bureau Group Co.Ltd,Xianyang 7 1 2000。China) Abstract:Objective To observe and analyze the effect of insulin and selenium combined application in the treatment of diabetes rats. Methods Diabetic models were established.The insulin treatment group involved injection(SC.);the selenium treatment group were treated with sodium selenite dissolved in redistilled water by gavage.Insulin and sodium selenite tWO doses were designed re— spectively(insulin:1 and 0.5 U・kg ;sodium selenite:1 80 and 60 tLg・kg_1).According to the L4(2。),an orthogonal experimen— tal design was used tO examine the rational proportion of insulin and selenium in combination.Results There was a cooperation effect between insulin and selenium.The rational proportion of insulin and selenium in combination was 1 U・kg :180 g・kg~.Conclusion The combined application of insulin and selenium was more effective than insulin and selenium alone in controlling glycaemia and there was a cooperation effect between insulin and selenium. Key words:insulin;selenium;diabetic rats;blood glucose 基金项目:西安医学院自然科学基金资助(编号:11FZ05) http://XBYZ.cbpt.cnki.net 

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