第３０卷第６期 宜春学院学报 Ｖｏ１．３Ｏ．Ｎｏ．６ ２００８年１２月 Ｊ０ｕｍａｌ ０ｆ Ｙｉｃｈｕｎ Ｃｏｕｅｇｃ Ｄｅｃ．２ｏ０８ ＨＰＬＣ法测定拳参药材中没食子酸的含量 张玮 。陈小清 （１．宜春学院化学与生物工程学院，江西 宜春３３６０ｏｏ；２．江西昌洪国药研究所，江西 南昌３３Ｏ０９６） 摘要：目的：测定拳参中没食子酸的含量。方法：采用高效液相色谱法，ＤｉａｒｎｏｒＩｓｉｌｃ ８色谱柱（１５０ｍｍ× ４．６ｍｍ，５ ｍ），流动相为甲醇一０．１％磷酸溶液（５：９５），检测波长２７３ｎｍ，流速为１．０ＩＩｌｌ・ｍｉｎ～，柱温为室 温。结果：在４．９３ ・ＩＩｌｌ～一４９．３Ｏ ｇ・ｍｌ－１范围内，没食子酸浓度（ｃ）与其峰面积（Ａ）呈良好的线性关系 （ｒ＝０．９９９９），平均回收率为９９．２％，ＲｓＤ＝Ｏ．６３％。结论：该法快速简单，稳定可靠，专属性强，可用于拳参 药材中没食子酸的含量测定。 关键词：拳参；没食子酸；高效液相色谱法；含量测定 中图分类号：Ｒ９６５文献标识码：Ａ文章编号：１６７ｌ一３８０Ｘ（２ｏｏ８）ｏ６一Ｏ１１９一ｏ２ 中药拳参为蓼科植物拳参Ｐ０ｂ．ｇｏｎ帆６ 砌Ｌ．的干燥 ２方法与结果 根茎¨］，具有清热解毒、消肿止痛等功效。用于赤痢、热 ２．１色谱条件 泻，肺热咳嗽，痈肿，口舌生疮，毒蛇咬伤等症 Ｊ。拳参 色谱柱：ＤｉａＩｌ１ｉｎｓｉｌ ｃＩ８（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５ ｎ）；流动 主要有效成份为没食子酸 Ｊ。近年来拳参药材中没食子酸 相：甲醇一０．１％磷酸（５：９５）；检测波长：２７３岫；流速 含量的测定方法报道较少 ，本试验通过简便的前处理方 为１．ＯｒＩｌｌ・ＩＩｌｉｎ‘。；柱温：室温；理论塔板数按没食子酸峰 法，建立高效液相色谱法测定拳参中没食子酸的含量，方 计算不低于３００ｏ；分离度大于１．５，对照品及拳参样品 法简便快速，精密度高，准确度好，专属性强。 ＨＰＬＣ色谱见图１。 １仪器与试药 ２．２对照品溶液的制备 ＬＣ一１０ＡＴ高效液相色谱仪、ＳＰＤ—ｌ０Ａ紫外检测器 精密称取没食子酸对照品适量，加５０％甲醇制成含没 （日本岛津）；Ｎ２Ｏｏｏ色谱数据工作站（浙江大学智能信息 食子酸９８．６ ・ｍｌ 的溶液，即得。 工程研究所）；ＳＢ２２ｏｏ超声波清洗器（上海必能信超声有 ２．３供试品溶液的制备 限公司）；ＡＢ２６５一Ｓ型电子天平（梅特勒一托利多公司）； 取拳参药材粉末（过四号筛）约Ｏ．３ｇ，精密称定，置 Ｔｕ一１９Ｏ１型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限 １５０ＩＩｌｌ具塞锥形瓶中，精密加入５０％甲醇５ＯＩＩｌｌ，密塞，称 公司）。 定重量，超声处理（功率１５０ｗ，频率５ＯｋＨｚ）３Ｏ分钟，放 拳参药材（购白药店），没食子酸对照品（０８３１— 冷，再称定重量，用５０％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤 ９５０１，购自中国药品生物制品检定所）。甲醇为色谱纯，其 过，取续滤液，即得。 他试剂均为分析纯，水为超纯水。 时问（ｍｉｎ） 时问（ｍｉｎ） Ａ Ｂ 图１没食子酸对照品与拳参液相图谱 Ａ．没食子酸对照品；Ｂ．拳参样品；Ｉ．没食子酸（ｇａｕｉｃ ａｃｉｄ） ２・４线性关系考察 １０Ｉｎｌ的量瓶中，加甲醇至刻度，即得４．９３ ．ｍｌ一、 分别精密吸取９８・６ ｇ。ＩｒＩｌ一。的没食子酸对照品溶液 ９．８６ ・ＩＩｌｌ～、１９．７２ ｇ・ＩＩｌｌ～、２９．５８ ・ＩＩｌｌ～、３９．４４ ０・５ｌＩｌｌ、ｌ・Ｏｍｌ、２．Ｏｍ１、３．０ｒｎｌ、４．０ｍｌ、５．ＯｒＩｌｌ，分别置 ・ＩＩｌｌ～、４９．３Ｏ ｇ・ｌＩｌｌ一。的没食子酸对照品溶液，分别精密 收稿日期：２ｏｏ８一ｌ１一ｏ５ 作者简介：张玮（１９８２一），男，江西永丰县人，理学学士，研究方向：药物制剂、药物分析及药物化学。 ・１１９・ 第６期 宜春学院学报 第３０卷 吸取１Ｏ ，依次注入液相色谱仪，测定，以峰面积（Ａ） ２８４．９２，Ｒ２＝０．９９９９，没食子酸在４．９３ ・ＩＩｌｌ～一４９．３Ｏ 对浓度（Ｃ）进行线性回归，得回归方程为：Ａ＝ｌ１５３７Ｃ＋ ・Ｉｎｌ 范围内成良好线性关系，结果见表ｌ。 表１没食子酸线性关系 ２．５精密度试验 次，测定没食子酸的峰面积，结果见表２。本法精密度良 精密吸取没食子酸对照品溶液ｌ０ ｌ，重复进样测定５ 好。 表２精密度试验结果 ２．６稳定性试验 ｈ和２４ｈ进样，测定拳参中没食子酸的峰面积，结果见表 精密吸取供试品溶液１０ ｌ，分别于Ｏ ｈ、２ ｈ、６ ｈ、１２ ３。方法稳定性较好，在２４小时内测定结果稳定。 表３稳定性试验结果 ２．７重复性试验 表６拳参药材中没食子酸的含量测定结果（ｎ＝３） 取同一批次拳参样品６份，按“供试品溶液的制备” 项下所述方法，制备６份供试品溶液，分别进样ｌ０ ，记 录峰面积，计算没食子酸含量，结果见表４。结果表明，本 方法重复性良好。 表４重复性试验结果 ３讨论 ３．１超声时间考察取同一批样品，按“供试品溶液的制 ２．８回收率试验 备”项下方法操作，超声处理时间分别设置为３０ｍｉｎ、 采用加样回收法。精密称定已知没食子酸含量的拳参 ４５ｍｉｎ、６Ｏｍｉｎ，提取液中没食子酸的含量分别为４．２８ｍｇ・ 药材（含量４．２０ｍｇ・ｇ ）９份，分别加人没食子酸对照品 ｇ～、４．２１ｍｇ一・ｇ、４．２５ｍｇ・ｇ～，从数据结果可以看出， 溶液（０．１３７８ｍｇ・ｍｌ ）４．０ｍｌ、５．Ｏｒｎｌ、６．Ｏｍ１，照含量测 样品超声处理３Ｏｍｉｎ即可提取完全。 定方法测定，以下列公式计算回收率，结果见表５。 ３．２提取溶剂的选择曾采用２５％甲醇、５０％甲醇、７５％ 表５回收率试验结果 甲醇及纯甲醇作为提取溶剂，测定结果表明，采用５０％甲 醇作为提取溶剂，提取液中没食子酸的含量最高。 ３．３检测波长的确定取对照品溶液在２００ ｌｍ一４００ｎｍ波 段范围内进行光谱扫描，没食子酸在２７３ｎｍ处有最大吸收， 故选择２７３ ｎｍ为测定波长。 ３．４流动相的选择流动相比例曾采用甲醇一０．１％磷酸 溶液为１５：８５，结果供试品中没食子酸峰与其他组分未达 到基线分离，选用本试验的流动相比例，供试品ＨＰＬＣ色 谱图中没食子酸成分的分离度大于１．５。 参考文献： ［１］国家中医药管理局《中华本草》编委会．中华本草（上 册）［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，１９９６．３３５ 回收率％： 塑堕 旦 量×１００％ ［２］刘晓秋，陈发奎，吴立军，等．拳参的化学成分［Ｊ］．沈 。一 加入的没食子酸量 阳药科大学学报，２０ｏ４，２１（３）：１８７—１８９ ２．９样品含量测定 ［３］常新宝，丁丽霞．中药活性成分分析手册［Ｍ］．北京： 取不同批次拳参药材粉未（过四号筛）约０．３ｇ，精密 学苑出版社，２ｏｏ２．１７４Ｊ４ 称定，照“供试品溶液的制备”项下方法进行操作，依法 ［４］刘瑞，何方奕，李磊，等．高效液相色谱法同时测定拳参 测定，按外标法计算没食子酸的含量，结果见表６。 药材中没食子酸和绿原酸的含量［Ｊ］．药物分析杂志， ２ｏ０５，２５（４）：３９Ｏ一３９３ ・ｌ２０・
