垦际检验医学杂志２０１３年２月第３４卷第４期Ｉｎｔ Ｊ ＬａｂＭｅｄ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１３，Ｖｏ１．３４，Ｎｏ．４ ・ ４９５ ・ ・经验交流・ １２５例乙肝病毒携带产妇乳汁ＨＢＶ—ＤＮＡ与血清 ＨＢＶ—ＤＮＡ水平的相关性分析 龙波，吕 微，魏秀丽 （海南省三亚市第４２５医院检验科，海南三亚５７２００８） 摘要：目的通过分析乙肝产妇血清标志物与血清、乳汁ＨＢＶ—ＤＮＡ含量的关系，探讨母乳喂养安全性问题并指导母乳喂 血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性产妇中，ＨＢｅＡｇ（＋）占７６ ，ＨＢｅＡｇ（一）占２４ ，乳汁ＨＢＶ－ＤＮＡ 养。方法 采用实时荧光定量ＰＣＲ（Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ，ＲＱ－ＰＣＲ）方法，对１２５例乙肝产妇，测定其血清标志物，同时检 测血清、乳汁中ＨＢｖ－ＤＮＡ含量。结果阳性产妇中，ＨＢｅＡｇ（＋）占８Ｏ ，ＨＢｅＡｇ（一）占２Ｏ ，两组比较有显著差异；血清ＨＢｅＡｇ（＋）产妇中，血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性占 ９３．３ ，乳汁ＨＢＶ—ＤＮＡ阳性占７７．３ ，血清ＨＢｅＡｇ（一）产妇中，血清ＨＢＶ—ＤＮＡ阳性占３２ ，乳汁ＨＢＶ—ＤＮＡ阳性占２Ｏ ，两 组比较差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１）；血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与乳汁中ＨＢＶ－ＤＮＡ含量呈正相关，（ｒ一０．５９１，Ｐ＜Ｏ．０５）。结论 产妇血清与乳汁ＨＢＶ－ＤＮＡ含量具有密切相关性，定量检测其含量，能确定哺乳方式，指导母乳喂养。而血清中的ＨＢｅＡｇ与 血清、乳汁中ＨＢｖ＿ＤＮＡ含量无明显关系，ＨＢｅＡｇ血清标志物检测不能作为产妇哺乳传染性指标。 关键词：肝炎病毒，乙型； 血清； 乳，人； 聚合酶链反应 Ｄ０Ｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３０．２０１３．０４．０５４ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７３—４１３０（２０１３）０４—０４９５—０２ 乙型肝炎（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ，ＨＢ）是一种危害人类健康的世界性 血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性的产妇７５例，血清ＨＢｅＡｇ（＋）为５７例， 传染病，我国为高危区。在中国每年有２ ５００万人死于乙型肝 占７６ ；ＨＢｅＡｇ（一）１８例，占２４ ，两者比较，ＨＢｅＡｇ（＋）组 炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ，ＨＢＶ）感染引起的肝脏疾病。乙肝病 阳性率高于ＨＢｅＡｇ（一）组，差异有统计学意义（Ｐｄ０．０１）。乳 毒传染的主要途径是血源性传播，也可经口和母婴垂直传播。 汁ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性产妇４５例，血清ＨＢｅＡｇ（＋）３６例，占 母婴传播引起的ＨＢＶ感染在我国约占婴幼儿感染的１／３，产 ８Ｏ ，ＨＢｅＡｇ（一）９例，占２Ｏ ，两者比较，ＨＢｅＡｇ（＋）组阳性 后母乳喂养是引起乙肝病毒感染的重要因素口］。近年来许多 率高于ＨＢｅＡｇ（一）组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。 ＨＢＶ感染产妇因新生儿是否母乳喂养而困惑，乙肝产妇能否 ２．２根据血清标志物ＨＢｅＡｇ是否阳性将实验组分为ＨＢｅＡｇ 哺乳喂养，目前尚有争议［２ ］。为进一步了解产妇血清ＨＢＶ－ （＋）组与ＨＢｅＡｇ（一）组比较两组血清、乳汁ＨＢＶ－ＤＡＮ阳性 ＤＮＡ含量和母乳的传染性关系，我们对１２５例乙肝血清学阳 率。结果：ＨＢｅＡｇ（＋）组血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为９３．３ 性产妇进行了血清与乳汁中ＨＢＶ－ＤＡＮ含量定量检测，报告 （７０／７５），含量为１．６４Ｅ＋０７±２．６９Ｅ＋０７ ｅｏｐｙ／ｍＬ，乳汁 如下。 ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为７７．３ （５８／７５），含量为１．６４Ｅ＋０３－Ｌ＿ －１材料与方法 ２．６９Ｅ＋０３ ｃｏｐｙ／ｍＬ，ＨＢｅＡｇ（一）组血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为 １．１ 标本来源 １２５例产妇标本来自本院２００８年３月至 ３２ （１６／５０）含量为２．６４Ｅ＋０７±４．６９Ｅ＋０７ ｅｏｐｙ／ｍＬ，乳汁 ２０１０年１２月住院产妇，其血清学检测ＨＢｓＡｇ阳性。 ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为２Ｏ （１０／５０），含量为１．７４Ｅ＋０３士 １．２方法 产妇分娩２４ ｈ内，用温开水檫洗乳头，取３～４ ３．６９Ｅ＋０３ ｅｏｐｙ／ｍＬ，两者比较，血清、乳汁ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率 ｍＬ乳汁置无菌容器盒内，同时采集２～３ ｍＬ血液于无菌干燥 有显著性差异Ｐ＜０．０１；但含量无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。 试管内，立即送检。 ２．３ 血清ＨＢＶ—ＤＮＡ含量与乳汁ＨＢＶ－ＤＮＡ含量 １２５例 １．３乳汁ＤＮＡ提取乳汁置２～８℃冰箱内过夜，在中间层 血清乙肝标志物阳性产妇中，血清ＨＢＶ—ＤＮＡ含量＞１．０Ｅ＋ 取１ ｍＬ于无菌Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ离心管中，然后４℃，１５ ０００ ｒ／ｍｉｎ， ０３ ｅｏｐｙ／ｍＬ，＜１．０Ｅ＋０５ ｅｏｐｙ／ｍＩ ６６例，占７６．７ （６６／８６） 离心１０ ｍｉｎ，去脂肪层，留沉淀，用１ ｍＬ无菌生理盐水洗涤， 例，乳汁ＨＢｖ．ＤＮＡ含量＞１．０Ｅ＋０３ ｃｏｐｙ／ｍＬ，＜１．０Ｅ＋０５ ４℃，１５ ０００ ｒ／ｍｉｎ，离心１０ ｍｉｎ，去上清液，加５０ Ｌ ＤＮＡ提 ｃｏｐｙ／ｍＬ ５８例，占８５．３ （５８／６８）例；血清ＨＢＶ—ＤＮＡ含量＞ 取物。 １．０Ｅ＋０５ ｃｏｐｙ／ｍＬ，＜１．０Ｅ＋０８ ｃｏｐｙ／ｍＬ １８例，占２０．９ １．４血清ＤＮＡ提取取ｉ００ Ｌ血清于无菌Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ离心 （１８／８６），乳汁ＨＢＶ－ＤＮＡ含量＞１．０Ｅ＋０５ ｃｏｐｙ／ｍＩ ，＜１．０Ｅ 管中，加等量ＤＮＡ浓缩液，混匀，然后４℃，１２ ０００ ｒ／ｍｉｎ，离 ＋０８ ｃｏｐｙ／ｍＬ １０例，占１４．７ （１０／６８）；血清ＨＢＶ—ＤＮＡ含量 心１０ ｍｉｎ，去上清液，加３Ｏ Ｌ ＤＮＡ提取物。 ＞ｌ＿０Ｅ＋０８ ｃｏｐｙ／ｍＬ ２例占２．３ （２／８６），乳汁ＨＢＶ－ＤＮＡ １．５试剂与仪器 乙肝两对半ＥＬＩＳＡ试剂由上海科华生物 含量＞１．０Ｅ＋０８ ｃｏｐｙ／ｍＬ ０例，占０ ；血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ含 技术有限公司提供，ＨＢＶ—ＤＮＡ定量试剂由广州达安基因诊断 量与乳汁中ＨＢＶ－ＤＮＡ含量呈正相关（ｒ一０．５９１，Ｐ＜０．０５）， 中心提供，ＨＢＶ－ＤＡＮ定量扩增仪为达安公司７６００实时荧光 乙肝产妇乳汁中ＨＢＶ－ＤＮＡ含量随血清中ＨＢＶ—ＤＮＡ含量增 定量ＰＣＲ仪。ＨＢＶ—ＤＮＡ含量大于１．０Ｅ＋０３ ｃｏｐｙ／ｍＬ为检 加而相应增加。血清乙肝病毒载量高于乳汁，血清乙肝病毒载 测结果阳性。 量高，乳汁病毒载量也高。 １．６统计学处理检测结果采样ＳＰＳＳ １０．０软件进行统计分 ３讨 论 析，计量资料用ｔ检验，计数资料用Ｙ 检验，Ｐ＜０．０５为差异 ＷＨＯ大力提倡母乳喂养，在推行喂养应注意母乳喂养的 有统计学意义。 安全性。我国是乙肝高发区，母婴传播是乙肝病毒传染的一个 ２结 果 重要途径，减少和阻断母婴传播途径很有必要。在执行和宣传 ２．１血清、乳汁ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与血清ＨＢＶ标志物关系。 母乳喂养时，对可能发生乙肝病毒传播的产妇进行检查分析， ・４９６・ 国际检验医学杂志２０１３年２月第３４卷第４期Ｉｎｔ Ｊ ＬａｂＭｅｄ．Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１３，Ｖｏ１．３４，Ｎｏ．４ 为乙肝病毒携带产妇提供必要的医学指导。但是，关于乙肝病 毒携带产妇能否进行母乳喂养一直存在争议，一些研究表明乙 肝病毒携带产妇乳汁不会引起ＨＢＶ的传染，而另外一些研究 ＤＮＡ，而且血清和乳汁ＨＢＶ ＤＮＡ含量，在ＨＢｅＡｇ（一）组和 ＨＢｅＡｇ（＋）组间没有统计学差异，因此认为，不能仅仅凭借 ＨＢｅＡｇ（＋）来作为乙肝产妇ＤＮＡ复制和具有传染性的唯一 指标。本研究也说明，在指导母乳喂养的过程中，不能仅仅检 测血清中ＨＢｅＡｇ进行哺乳风险的评价，而要结合血清及乳汁 中ＨＢＶ－ＤＮＡ含量才能正确判断哺乳喂养的风险。 参考文献 ［１］张乐研，梁福燕，等．乙肝病毒标志物阳性产妇乳汁ＨＢＶ ＤＮＡ检 认为乙肝病毒携带产妇乳汁可以引起ＨＢＶ传染，初乳中由于 含有少量的血清成分，可能含有乙肝病毒，一旦婴儿消化道黏 膜因炎症发生水肿或黏膜破损，母乳中的乙肝病毒就可以通过 毛细血管进入血循环而引起感染。 不同乙肝血清学模式患者有不同的ＨＢＶ—ＤＮＡ复制，临 床常用Ｅ１ ＩＳＡ进行乙肝两对半检测，来反映体内乙肝病毒的 免疫状态，不能直接反映病毒在体内复制情况，两对半检测难 以对乙肝病毒复制情况及传染性强弱作出准确的判断。ＨＢＶ－ ＤＡＮ定量检测则能有效准确反映病毒复制情况及传染性强 弱 。 测结果分析［Ｊ］．实用医学杂志，２００７，２６（６）；７２５． ［２］Ｋｉｄｄ Ｌｊｕｎｇｇｒｅｎ Ｋ，Ｈｏｌｍｂｅｒｇ Ａ，Ｂｌａｃｋｂｅｒｇ Ｊ，ｅｔ ａ１．ｆｔｉｇｉ￣ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ ＤＮＡ ｉｎ ｂｏｄｙ ｆｌｕｉｄｓ ｆｒｏｍ ｃｈｒｏｎｉｃ ｃａｒｒｉｅｒｓ ｌ Ｊ］． ＪＨｏｓｐ Ｉｎｆｅｃｔ，２００６，６４（４）：３５２—３５ ７． 传统认为血清ＨＢｅＡｇ是乙肝病毒复制的重要指标。本 文利用ＨＢｅＡｇ进行分组，分析比较ＨＢｅＡｇ与血清、乳汁 ＨＢＶ—ＤＡＮ含量的关系，结果显示ＨＢｅＡｇ（＋）产妇血清和乳 ［３］ＲＭ Ｌａｗｒｅｎｃｅ，ＲＡ Ｌａｗｒｅｎｃｅ．Ｂｒｅａｓｔ ｍｉｌｋ ａｎｄ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎＥＪＪ．Ｃｌｉｎｉｃｓ ｉｎ Ｐｅｒｉｎａｔｏｌｏｇｙ，２００４．３ｌ（３）：５０１ ５２８． ［４］张乐研，梁福燕，等．乙肝病毒标志物阳性产妇乳汁ＨＢＶ Ｉ）ＮＡ检 测结果分析［Ｊ］．实用医学杂志，２００７．２４（６）：７２５． 汁ＨＢＶ—ＤＮＡ阳性率高于ＨＢｅＡｇ（一）产妇，说明ＨＢｅＡｇ与 ＨＢＶ—ＤＮＡ关系密切，多数ＨＢｅＡｇ阳性者病毒复制活跃，可 能具有较强的传染性，这与其他研究结果一致 。对于 ＨＢｅＡｇ（一）阴性产妇，也能在血清与乳汁中检测出ＨＢＶ一 ・Ｅｓ］童福易，吴建鸿，吴兴，等．乙型肝炎病毒标志物与病毒载量的关 系ＥＪ］．抗感染药学，２００５，２（１）：１８ ２０． （收稿日期：２ｆ＇ｌ２ １０ ０６） 经验交流・ 食物不耐受与变态反应性皮肤病的相关性研究 戴亚兰，游天健△，蔡东华 （福建省石狮市医院皮肤科，福建石狮３６２０００） 摘要：目的观察食物不耐受与变态反应性皮肤病的相关性，为临床提供诊治依据。方法 采用酶联免疫方法ＬＥＩ１ＳＡ）半 定量检测１８７例变态反应性皮肤病患者血清中１４种食物过敏原特异性ＩｇＧ抗体，并对不同年龄及不同疾病组进行分析比较 结 果 １８７例患者中，检测阳性者１２４例（６６．３ ），１４种食物中，牛奶的ＩｇＧ阳性率最高（４７．１ ），其次是鸡蛋（４０ １ ）．未见对西 红柿、小麦和猪肉的不耐受，Ｏ～２４个月食物过敏原特异性ＩｇＧ抗体检测的阳性率８６．４ （５１／５９）。是３个年龄组中最高的 牛奶 的阳性率在各年龄组中比较，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５），３组疾病中湿疹患者的阳性率最高（８Ｏ．４ ）．荨麻疹最低 （３８．５ ）。结论食物不耐受与变态反应性皮肤病尤其湿疹的发生具有相关性，检测食物过敏原特异性ＩｇＧ抗体对于变态反应 性皮肤病病因的诊断及治疗具有重要意义。 关键词：食物不耐受；皮肤病；相关性 ＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３Ｏ．２Ｏ１３．０４．０５５ 文献标识码：Ｂ 文章编号：ｌ６７３—４１３０（２０１３）０４—０４９６ ０３ 近年来，随着社会经济的发展，食品呈现多样化，由食物引 发的变态反应性皮肤病的发病率日益增加，食物不耐受的现象 也越来越多见。食物不耐受是一种复杂的变态反应性疾病，可 表现为全身各系统疾病，其中最常见的是皮肤、呼吸道和消化 道的症状。但其发病通常较为隐匿，不易察觉，因此未能得到 及时的诊治。本文选取了１８７例在我院皮肤科门诊就诊的过 敏性皮肤病患者进行１４种食物过敏原特异性ＩｇＧ抗体检测， 其结果报道如下。 １资料与方法 临床症状、体征分组：湿疹组（ｎ＝１０７）、慢性荨麻疹组Ｌ，Ｊ一３９） 和皮炎组（”一４１）。 １．２方法采用美国ＢＩＯＭＥＲＩＣＡ公 食物小耐受检测试 剂盒，应用酶联免疫方法（ＥｌＩＳＡ）半定量检测患者ｍ清中ｌ４种 食物过敏原特异性ＩｇＧ抗体。正常状态Ｆ抽取患者静脉血３ ｍＩ ，以３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心３ ｍｉｎ，分离血清，按试剂盒说明书操 作。其中动物来源的食物包括牛肉、鸡肉、鳕鱼、蟹 鸡蛋、牛 奶、猪肉、虾；植物来源的食物包括玉米、蘑菇、大米、大豆、曲红 柿、小麦。结果判定标准参照说明书：ｌｇＧ＜Ｃ５０ Ｕ ｍＩ 为阴性 １．１ 一般资料选择２０１Ｏ年５月至２０１１年５月在本院皮肤 （一），ＩｇＧ在５Ｏ～１００ ｕ／ｍＩＪ为轻度不耐受Ｌ＋），ｌｇＧ在１００～ ２００ Ｕ／ｍＬ为中度不耐受（十 ｑ－），ＩｇＧ＞２００ Ｕ／ｍｌ 为重发不耐 受（＋＋＋）。 １．３统计学处理采用ＳＰＳＳ １０．０统计学软件分析数据．率 科门诊就诊的过敏性皮肤病患者１８７例，其中男１０２例，女８５ 例，年龄１个月～６１岁。（１）按年龄分组：０～２４个月组（ 一 ５９）、２４个月至１４岁组（ 一５１）和＞１４岁组（ 一７７）。（２）根据 通讯作者，Ｅ—ｍａｉｌ：ｙｏｕｔｉａｎｊｉａｎｌ９６３＠１６３．ＣＯＩＩＩ。
