乙肝病毒标志物在胎儿和胎盘组织中的表达及其与HBV母婴传播关系的研究

第１６卷第３期　中国组织　化学与细胞化学杂志　Ｖ０１．１６．Ｎｏ．３　２００７年６月　ＣＨＩＮＥＳＥ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　Ｙ　ＡＮＤ　Ｙ　ＪｕｒＬ　２００７　乙肝病毒标志物在Ｈ￣Ｊ　Ｌ　ＳＮ胎盘组织中的表达及其与　ＨＢＶ母婴传播关系的研究　白　菡　张　琳　窦晓光　冯国和　张一力　赵桂珍　（中国医科大学附属盛京医院感染科，沈阳１１０００４；　辽河油田第一职工医院干诊科，盘锦１２１ＯＯＯ）　［摘要）　目的通过对乙肝阳性产妇外周血、胎儿及胎儿附属物进行乙肝病毒标志物的检测，探讨ＨＢＶ宫内感染　发生的机制。方法通过ＥＬＩＳＡ法及实时荧光定量ＰＣＲ法检测血清标本中ＨＢＶ标志物及ＨＢＶ　ＤＮＡ水平；通过对组织　标本的免疫组织化学染色检测组织中ＨＢＶ标志物的表达。结果胎儿脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平与母血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平相关，　母血ＨＢＶ　ＤＮＡ高水平（≥１０７ｃｏｐｙ／ｍＬ）时脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性率明显增高，Ｐ＜Ｏ．０５。胎儿脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平显著低　于母血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平，Ｐ＜Ｏ．０５。胎盘组织可见ＨＢｓＡｇ免疫组织化学染色阳性，但未发现ＨＢｃＡｇ染色阳性。在引产胎　儿胎肝和胎肾组织中发现ＨＢｓＡｇ和／或ＨＢｃＡｇ免疫组织化学染色阳性细胞。结论母亲ＨＢＶ　ＤＮＡ高水平是发生ＨＢＶ宫　内感染的高危因素。脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性是判断ＨＢＶ宫内感染的相关指标；ＨＢＶ可能通过胎盘感染的途径由母体进入胎　儿体内，并可能在，￣ｉｆＪＬ体内定位和复制，这可能是导致ＨＢＶ宫内感染的原因。　［关键词］　乙型肝炎病毒；　宫内传播；　机制　［中图分类号］　Ｒ５１２．６　［文献标识码］　Ａ　ＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰ　ＢＥＴ、）￣，ＥＥＮ　ＴＨＥ　ＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮ　ｏＦ　ＨＢＶ　ＭＡＲＫＥＲＳ　ＩＮ　ＦＥＴＵＳ　ＡＮＤ　ＰＬＡＣＥＮＴＡ　ＡＮＤ　ＴＨＥ　ＴＲＡＮＳＭＩＳＳＩＯＮ　ｏＦ　ＨＢＶ　ＦＲＯＭ　ＭＯＴＨＥＲ　Ｔｏ　ＩＮ　＇ＡＮＴ　Ｂａｉ　Ｈａｎ，Ｚｈａｎｇ　Ｉ　ｉｎ　，Ｄｏｕ　Ｘｉａｏｇｕａｎｇ，Ｆｅｎｇ　Ｇｕｏｈｅ，Ｚｈａｎｇ　Ｙｉｌｉ，Ｚｈａｏ　Ｇｕｉｚｈｅｎ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｓｈｅｎｇｊｉｎｇ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｉｎａ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１　１０００４，Ｃｈｉｎａ）　［Ａｂｓｔｒａｃｔ￣　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ＨＢＶ　ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＨＢＶ　ｍａｒｋｅｒｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｆｅｔｕｓ　ａｎｄ　ｆｅｔａｌ　ａｐｐｅｎｄａｇｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＨＢＶ　ｍａｒｋｅｒｓ　ａｎｄ　ＨＢＶ　ＤＮＡ　ｌｅｖｅｌｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ＥＩ　ＩＳＡ　ａｎｄ　ｒｅａｌ　ｔｉｍｅ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｅｄ　ＰＣＲ　ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ：ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＨＢＶ　ｍａｒｋｅｒｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ＨＢＶ　ＤＮＡ　ｌｅｖｅｌｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｒｄ　ｂｌｏｏｄ　ｗａｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍａｔｅｒｎａｌ　ｂｌｏｏｄ．Ｗｈｅｎ　ＨＢＶ　ＤＮＡ　ｌｅｖｅｌ　ｗａｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　１０　ｃｏｐｙ／　ｍｌ，ｔｈｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＨＢＶ　ＤＮＡ　ｐｏｓｉｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｃｏｒｄ　ｂｌｏｏｄ　ｗａｓ　ｍｕｃｈ　ｈｉｇｈｅｒ，ｗｉｔｈ　ａ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜　０．０５）．ＨＢＶ　ＤＮＡ　ｌｅｖｅｌｉｎ　ｃｏｒｄ　ｂｌｏｏｄ　ｗａｓ　ｍｕｃｈ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｍａｔｅｒｎａｌ　ｂｌｏｏｄ（ＰｄＯ．０５）．ＨＢｓＡｇ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｌａｃｅｎｔａ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ，ｂｕｔ　ＨＢｃＡｇ　ｗａｓ　ｎｏｔ．ＨＢｓＡｇ　ａｎｄ／ｏｒ　ＨＢ－　ｃＡｇ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｉｖｅｒ　ａｎｄ　ｋｉｎｄｎｅｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｔｕｓ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｃｏｎｅｌｕｓｉｏｎ　Ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｆ　ＨＢＶ　ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＨＢＶ　ＤＮＡ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｏｔｈｅｒ．ＨＩⅣＤＮＡ　ｐｏｓｉｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｒｄ　ｂｌｏｏｄ　ｗａｓ　ａ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｉｎｄｅｘ　ｏｆ　ＨＢＶ　ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｆｅｔｕｓ　ｍｉｇｈｔ　ｂｅ　ｉｎｆｅｃｔｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｅ　ｒｏｕｔｅ　ｏｆ　ｐｌａｃｅｎｔａｌ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ　ＨＢＶ　ｍｉｇｈｔ　ｌｏｃａｔｅ　ａｎｄ　ｄｕｐｌｉｃａｔｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｆｅｔｕｓ．Ｔｈｉｓ　ｍｉｇｈｔ　ｂｅ　ｔｈｅ　ｒｅａｓｏｎ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＨＢＶ．　ＣＫｅｙ　ｗｏｒｄｓ３　Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｖｉｒｕｓ；　Ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ；　Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　乙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｖｉｒｕｓ，ＨＢＶ）的母　（收稿日期］２００６－１１—２３　（修回日期］２００７－０１—２８　婴传播是我国ＨＢＶ携带者和慢性乙型肝炎发生的　［基金项目］辽宁省自然科学基金（９９１０５００７０６）　重要原因　。目前采用乙肝疫苗和乙肝高效价免疫　［作者简介］白菡，女（１９７２年），满族，博士，讲师。　球蛋白（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ，ＨＢＩＧ）联　＊通讯作者（Ｔ０　ｗｈｏｍ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ　ｓｈｏｕｌｄ　ｂｅ　ａｄｄｒｅｓｓｅｄ）　合免疫阻断ＨＢＶ的母婴传播已经取得了较好的效　维普资讯 http://www.cqvip.com

中国组织化学与细胞化学杂志　第１６卷　果［２］，但是仍有大约１Ｏ　的ＨＢＶ血清学标志物　阳性的母亲所生的新生儿免疫阻断失败，成为慢性　ＨＢＶ感染者［３］。目前认为免疫阻断失败的主要原　因是ＨＢＶ的宫内感染［４］。ＨＢＶ的宫内传播机制　时及出生后１个月联合注射乙型肝炎高效价免疫球　蛋白。生后６个月时检测血清ＨＢＶ标志物。５例　乙肝病毒血清学标志物阴性引产孕妇及５例正常分　娩孕妇分别作为阴性对照。　２．实验方法　目前尚不清楚。在宫内传播的过程中，胎盘组织起　重要作用，母体内的ＨＢＶ　ＤＮＡ需要通过胎盘屏　障感染胎儿。　本研究通过对２Ｏ例ＨＢＶ血清学标志物阳性　２．１通过ＥＩ　ＩＳＡ法进行血清标本中ＨＢＶ标　志物的检测。　实验方法按照试剂盒使用说明书要求的方法进　孕妇的外周静脉血、脐血、胎盘组织、及引产胎儿　行操作。　的组织器官进行检测，探讨ＨＢＶ宫内感染发生的　２．２应用实时荧光定量ＰＣＲ检测血清标本的　机制。　ＨＢＶ　ＤＮＡ水平：　材料和方法　试剂盒由深圳市匹基生物工程股份有限公司生　产。操作方法严格按照试剂盒使用说明书进行。　１．研究对象　２．３组织标本的免疫组织化学染色：　选择２００２年１Ｏ月至２００４年１２月在中国医科　免疫组织化学染色采用常规的ＡＢＣ法进行染　大学附属第二医院妇产科病房进行正常分娩或引产　色。按照试剂盒使用说明书要求的操作方法并根据　的ＨＢＶ血清学标志物阳性孕妇２Ｏ例，孕妇年龄　予实验的结果适当调整孵育时间。以乙型肝炎病毒　２３—３８岁。其中６例为引产终止妊娠，孕周为１３　血清学标志物阴性孕妇胎盘及胎儿组织标本为阴性　－３３周。终止妊娠原因为胎儿发育异常或胎死宫　对照，以慢性乙型肝炎患者肝穿组织标本为阳性对　内。其余１４例正常分娩，胎儿出生后均健康，男　照。　婴６例，女婴８例。２Ｏ例孕妇均未进行过抗病毒　３．统计学分析　治疗，人院时肝功能检查正常，无肝炎症状。配偶　实验数据用　±ｓ表示，用ＳＰＳＳ　ｆｏｒ　Ｗｉｎｄｏｗｓ　乙肝病毒血清学检测均为阴性。留取孕妇外周静脉　１０．０软件对数据进行统计学分析。组间两两比较　血、胎儿脐血，分离血清，－－２０℃冰箱保存。胎盘　采用ＬＳＤ法。Ｐ＜Ｏ．０５为显著性差异界限。　组织及引产胎儿肝脏、心脏、肺脏、脾脏、。肾脏标　本用手术刀片切取约１．０　ｃｍ。大小的组织块，福尔　结　果　马林固定。新生儿出生后按常规程序于出生后２４　１．孕妇及胎儿脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ检测结果　小时内、１个月、６个月接种乙肝疫苗，并在出生　表１　２Ｏ例ＨＢＶ阳性孕妇外周血及其胎儿脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ检测结果　Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ＨＢＶ　ＤＮＡ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍａｔｅｒｎａｌ　ｂｌｏｏｄ　ａｎｄ　ｆｅｔｕｓ　ｃｏｒｄ　ｂｌｏｏｄ　维普资讯 http://www.cqvip.com

第３期　白　菡等。乙肝病毒标志物在胎儿和胎盘组织中的表达及其与ＨＢＶ母婴传播关系的研究　３２１　２Ｏ例母亲血清ＨＢＶ　ＤＮＡ均为阳性，有６例　母血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平。我们比较了母血ＨＢＶ　胎儿脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性，这６例胎儿母血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平与脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平的关系，如表２　ＤＮＡ水平均在１Ｏ　以上。脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性率　所示。　为３Ｏ％，而且胎儿脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平显著低于　表２母亲血清ＨＢＶ　ＤＮＡ水平与胎儿脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平的关系　Ｔａｂｌｅ　２　Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ＨＢＶ　ＤＮＡ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｍａｔｅｒｎａｌ　ｂｌｏｏｄ　ａｎｄ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｆｅｔｕｓ　ｃｏｒｄ　ｂｌｏｏｄ　Ｐｄｏ．０５　结果表明脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平与母血ＨＢＶ　３３周引产胎儿在胎肝组织中发现ＨＢｓＡｇ阳性细　ＤＮＡ水平密切相关，母血ＨＢＶ　ＤＮＡ呈高水平时　胞，在胎肾组织中发现ＨＢｓＡｇ及ＨＢｅＡｇ阳性细　（≥１０　）脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性率明显增高。与　胞。在另１例２８周引产胎儿胎肝组织中发现中发　ＨＢＶ　ＤＮＡ呈低水平组（＜１０　）相比有显著性差　现ＨＢｓＡｇ及ＨＢｃＡｇ阳性细胞，在其胎肾和脾脏　异。　中发现ＨＢｓＡｇ阳性细胞。还在１例２５周引产胎　２．胎盘及引产胎儿组织器官ＨＢｓＡｇ及ＨＢ—　儿胎肝和胎肾组织中发现ＨＢｓＡｇ阳性细胞。胎肝　ｃＡｇ的免疫组织化学检查　内肝小叶结构尚不清楚，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ阳性　２．１胎盘组织的免疫组织化学染色结果　细胞散在于肝实质中，胎肾中肾小球和肾小管结构　对２Ｏ例孕妇的胎盘组织进行ＨＢｓＡｇ和ＨＢ—　清楚，ＨＢｓＡｇ阳性细胞散在于肾小管和肾小球细　ｃＡｇ的免疫组织化学染色，结果有６例孕妇胎盘组　胞。ＨＢｃＡｇ阳性细胞见于肾小球及肾小球囊脏层　织ＨＢｓＡｇ免疫组织化学染色阳性，未发现胎盘组　细胞。对照组引产胎儿组织器官中均未见阳性细　织ＨＢｃＡｇ免疫组织化学染色阳性。胎盘组织染色　胞。（见图２）　阳性的孕妇中有５例脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ检测阳性，　３．正常分娩新生儿６个月随访结果　有１例脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ为阴性。还有一例脐血　６个月后，有１Ｏ例新生儿获得随访，其中一　ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性，而胎盘免疫组织化学染色未见　例血清ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ和抗一ＨＢｃ阳性。其余９　ＨＢｓＡｇ阳性细胞。胎盘组织中ＨＢｓＡｇ染色阳性　例ＨＢｓＡｇ阴性。有６例抗一ＨＢｓ阳性。　细胞最多见于绒毛表面的滋养层细胞，亦可见于绒　毛间质细胞，在一例孕妇胎盘绒毛毛细血管内皮细　讨　论　胞见ＨＢｓＡｇ阳性染色。对照组未见有阳性染色　临床上常用检测胎儿脐血或新生儿外周血　（图１）。　ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶ　ＤＮＡ来进行宫内感染的诊断［引。　２。２胎儿组织器官免疫组织化学染色结果　我们对２Ｏ例孕妇所生胎儿的脐血进行了ＨＢＶ　对６例引产胎儿的胎肝、胎肾、胎心、脾脏、　ＤＮＡ的检测。检测结果６例胎儿脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ　胎肺组织进行染色。结果在６例胎儿标本中，１例　阳性，脐血的ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性率为３Ｏ％，其中３　维普资讯 http://www.cqvip.com

３２２　中国组织化学与细胞化学杂志　第１６卷　例为引产胎儿，另外３例为正常分娩的新生儿。孕　妇血清ＨＢＶ　ＤＮＡ高水平是发生ＨＢＶ宫内感染的　危险因素［６］，孕妇血清ＨＢＶ　ＤＮＡ高水平者脐血　ＨＢＶ　ＤＮＡ的阳性率高。这与已有的报道相一　致［ｒＪ。６个月后通过对新生儿进行随访，发现３例　脐血阳性的新生儿中，只有１例血清ＨＢｓＡｇ仍为　阳性，其余２例新生儿ＨＢｓＡｇ均为阴性，并且有　１例产生了抗一ＨＢｓ。说明脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性可　能并不一定表明发生了ＨＢＶ的宫内感染，有相当　～血污染的可能，该例新生儿生后６个月随访，没有　发生ＨＢＶ感染，且抗一ＨＢｓ阳性。而胎盘组织染　色阳性，脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阴性的病例，新生儿出　生后随访，也没有发生ＨＢＶ感染。表明发生胎盘　感染的病例并不一定导致新生儿成为慢性ＨＢＶ感　染者。胎盘感染与脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性相一致，　说明脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ可能通过胎盘感染获得。　ＨＢＶ可以通过胎盘屏障由母体到达胎儿体内。　我们对６例妊娠１３—３３周的引产胎儿组织器　官进行了ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的免疫组织化学检查，　结果分别在胎肝、胎肾和胎儿脾脏中发现了Ｈ　ｓＡｇ和／或ＨＢｃＡｇ阳性细胞。特别是在１例３３周　引产胎儿胎肾组织中发现ＨＢｃＡｇ阳性细胞和１例　２８周引产胎儿胎肝组织中发现ＨＢｃＡｇ阳性细胞，　部分新生儿出生时脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性，但在　出生后很快ＨＢＶ　ＤＮＡ阴转，并不成为ＨＢＶ携带　者。据报道脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ的检出率约为２Ｏ一　５Ｏ　ＡＥ０引，而在实际工作中我们发现，应用乙肝疫苗　和ＨＢＩＧ进行ＨＢＶ母婴传播的免疫阻断后，婴幼　儿ＨＢＶ的感染率大约只占ＨＢＶ血清学标志物阳　性母亲所生新生儿的１Ｏ　左右。也说明脐血阳性　不一定真实反应新生儿的ＨＢＶ宫内感染情况。但　是由于脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性率与母血ＨＢＶ　ＤＮＡ　水平明显相关，且发生宫内感染者均存在脐血　说明在胎儿组织器官中可能存在ＨＢＶ的定位和复　制。ＨＢＶ在胎儿组织器官内的定位和复制可能是　发生宫内感染的原因。在胎儿组织器官内，ＨＢＶ　的靶细胞可能不仅是肝细胞，其它脏器包括肾脏、　ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性，临床上脐血的采集又比较容易，　所以检测脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ可以作为预测宫内感染　发生的指标之一。　我们通过免疫组织化学方法对ＨＢｓＡｇ阳性孕　妇胎盘组织进行检测。结果表明，在胎盘组织中的　脾脏等可能也是ＨＢＶ复制的场所。　综上所述，我们的研究结果表明，母亲ＨＢＶ　ＤＮＡ高水平是发生ＨＢＶ宫内感染的高危因素。　脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性仅是判断ＨＢＶ宫内感染的一　个相关指标，但并不是确诊宫内感染的依据；　ＨＢＶ可能通过胎盘感染的途径由母体进入胎儿体　内。并可能在胎儿体内的定位和复制，这可能是导　致ＨＢＶ宫内感染的原因。　参考文献　－　各层细胞均可见ＨＢｓＡｇ阳性细胞。ＨＢｓＡｇ在胎　盘组织中呈低水平表达，但是没有发现ＨＢｃＡｇ阳　性细胞。说明ＨＢＶ可以感染胎盘细胞。在妊娠过　程中，母血与胎盘表面的合体滋养层细胞直接接　触，可能是ＨＢＶ感染胎盘组织的途径。ＨＢＶ感　（１］Ｍｉｃｈｉｅｌｓｅｎ　ＰＰ，ｖａｎ　Ｄａｍｍｅ　Ｐ．Ｖｉｒａｌ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　ａｎｄ　ｐｒｅｇｎａｎｃｙ．Ａｃｔａ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ　Ｂｅｌｇ，１９９９，６２（１）：　２１—２９　染滋养层细胞的具体机制尚不清楚，有报道ＨＢＶ　可能通过滋养层细胞表面的ＩｇＧ－Ｆｃ受体介导的　“内化”作用进入滋养层细胞［９］。滋养层细胞的　ＨＢＶ感染可能是ＨＢＶ通过胎盘屏障的第一步。　特另Ⅱ是在妊娠晚期，胎盘屏障逐渐变薄，细胞滋养　（２］Ｘｕ　Ｑ，Ｘｉａｏ　Ｌ，Ｌｕ）（Ｂ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ　ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｔｒｉａｌ：ｉｎｔｅｒｒｕｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　Ｈ１３１Ｇ－Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｇａｓｔｒｏ—　ｅｎｔｅｒｏ１．２００６，１２（２１）：３４３４—７　层细胞逐渐减少，呈单层排列，合体滋养层细胞的　核聚集在一起，其余部分扁而薄，与毛细血管内皮　（３３　Ｚａｍ　ｉｒ　Ｃ，Ｄａｇａｎ　Ｒ，Ｚａｍ　ｉｒ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｆｏｒ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｓｕｒｆａｃｅ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｄｕｒｉｎｇ　ｐｒｅｇｎａｎ—　紧贴在一起，两者间仅有一层基膜，有利于母胎之　间的物质交换，可能也更利于ＨＢＶ通过胎盘屏　障，这与宫内感染主要发生在孕晚期相一致。胎盘　的ＨＢＶ感染与脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ水平显著相关，在　我们的研究中，６例检测到了胎盘ＨＢＶ感染的孕　妇中有５例脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性，ｌ例脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阴性。还有１例脐血ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性，而胎　盘组织免疫组化染色阴性的病例，不除外脐血受母　ｃｙ　ｉｎ　ａ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ａ　ｈｉｇｈ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｓｕｒｆａｃｅ　ａｎｔｉｇｅｎ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ／ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｅ　ａｎｔｉｇｅｎ－ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｃａｒｒｉｅｒｓ．Ｐｅｄｉａｔｒ　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｉｓ　Ｊ，１９９９，１８：２６２－２６６　＜４３　Ｚｈｕ　Ｑ，Ｙｕ　Ｇ，Ｙｕ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｔｒｉａｌ　ｏｎ　ｉｎｔｅｒｒｕｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ＨＢＶ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｕｔｅｒｕｓ．Ｃｈｉｎ　Ｍｅｄ　Ｊ（Ｅｎｇ１），２００３，ｌ１６（５）：６８５—６８７　［５］Ｌｏｌｅｋｈａ　Ｓ，Ｗａｒａｃｈｉｔ　Ｂ，Ｈｉｒｕｎｙａｃｈｏｔｅ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｔｅｃ—　ｔｉｖｅ　ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｖａｃｃｉｎｅ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ＨＢＩＧ　ｉｎ　ｉｎ—　维普资讯 http://www.cqvip.com

第３期　白菡等．乙肝病毒标志物在胎儿和胎盘组织中的表达及其与ＨＢＶ母婴传播关系的研究　３２３　ｆａｎｔｓ　ｏｆ　ＨＢｅＡｇ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃａｒｒｉｅｒ　ｍｏｔｈｅｒｓ　ｉｎ　Ｔｈａｉｌａｎｄ．　疫组织化学染色。阳性细胞见于部分胎肝细胞。×　４０　Ｃ．胎肾组织ＨｍＡｇ免疫组织化学染色。阳性　细胞见于。肾小球及肾小管细胞。×４Ｏ　Ｄ．胎肾组织　ＨｎｃＡｇ免疫组织化学染色。阳性细胞见于肾小球及　肾小球囊脏层细胞。×４Ｏ　ＥＸＰＬＡＮＡＴＩＯＮ　ＯｌＦ　ＦＩＧＵＲＥＳ　Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｌａｃｅｎｔａ．　Ａ．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｌａｃｅｎｔａ，　ＨＢｓＡｇ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｅｌｌｓ　ａｒｅ　ｔｒｏｐｈｏｂｌａｓｔｉｃ　ｃｅｌｌｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｖａｃｃｉｎｅ，２００２，２Ｏ（３１－３２）：３７３９—３７４３　［６］Ｌｉｎ　ＨＪ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｆｏｒ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｖｉｒｕｓｅｓ：　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ａｎｄ　Ｃ　ｖｉｒｕｓｅｓ　ａｎｄ　ｈｕｍａｎ　ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ．Ｃｌｉｎ　Ｃｈｉｍ　Ａｃｔａ，２００１，３１３（１－２）：９－１３　［７３　Ｓｉｎｇｈ　Ｓ，Ｍｏｈａｎｔｙ　Ａ，Ｊｏｓｈｉ　ＹＫ，ｅｔ　ａ１．Ｍｏｔｈｅｒ－ｔｏ－ｃｈｉｌｄ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｅ　ｖｉｒｕｓ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｉｎｄｉａｎ　Ｊ　Ｐｃ－　ｄｉａｔｒ，２００３，７０（１）：３７—３９　［８］Ｎｇｕｉ　ＳＬ，Ａｎｄｒｅｗｓ　ＮＪ，Ｕｎｄｅｒｈｉｌ１　ＧＳ，ｅｔ　ａ１．Ｆａｉ１ｅｄ　ｏｓｔｐｎａｔａｌ　ｉｍｍｕｎｏｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ　ｆｏｒ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ：ｃｈａｒａｃｔｅｒ—　ｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｍａｔｅｒｎａ１　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｖｉｒｕｓ　ａｓ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒｓ．Ｃｌｉｎ　Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｉｓ，１９９８，２７：１００—１０６　［９３　Ｘｕ　ＤＺ，Ｙａｎ　ＹＰ，Ｚｏｕ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｐｌａｃｅｎｔａ１　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｖｉｕｒｓ．Ａｍ　Ｊ　Ｏｂｓｔｅｔ　Ｇｙｎｅｃｏｌ，２００１，１８５：９８１—９８７　图版说明　图１胎盘组织的免疫组织化学染色结果。　八胎盘组织ＨＢｓＡｇ免疫组织化学染色，阳性细胞　见于绒毛表面滋养层细胞。×４Ｏ　Ｂ胎盘组织Ｈ　ｓＡｇ免疫组织化学染色，阳性细胞见于绒毛毛细血　管内皮细胞。×４Ｏ　图２胎儿组织器官免疫组织化学染色结果　八胎肝组织ＨＢｓｇＡ免疫组织化学染色。阳性细胞　见于部分胎肝细胞。×４Ｏ　Ｂ胎肝组织ＨｎｃＡｇ免　ｓｕｒｆａｃｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｖｉｌｌｕｓ．×４０　Ｂ　Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉ—　ｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｌａｃｅｎｔａ，ＨＢｓＡｇ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｅｌｌｓ　ａｒｅ　ｃａｐｉｌｌａｒｙ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｖｉｌｌｕｓ．×４０　Ｆｉｇ．２　Ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｔａｌ　ｏｒｇａｎｓ　八Ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａ１　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｔａ１　ｌｉｖｅｒ．ＨＢｓＡｇ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｅｌｌｓ　ａ　ｓｏｍｅ　ｆｅｔａｌ　ｌｉｖｅｒ　ｃｅｌｌｓ．　×４Ｏ　Ｂ　Ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａ１　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｔａｌ　ｌｉｖｅｎ　ＨＢｃＡｇ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｅｌｌｓ　ａ　ｓｏｍｅ　ｆｅｔａｌ　ｌｉｖｅｒ　ｃｅｌｌｓ．×４０　Ｃ．Ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｔａｌ　ｋｉｄｎｅｙ．ＨＢｓＡｇ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｅｌｌｓ　ａｒｅ　ｓｏｍｅ　ｃｅｌｌｓ　ｏｆ　ｇｌｏｍｅｒｕｌｕｓ　ａｎｄ　ｔｕｂｕｌａｒ　ｃｅｌ１．×４０　Ｄ．Ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｔａｌ　ｋｉｄｎｅｙ．　ＨｍＡｇ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｅｌｌｓ　ａｒｅ　ｓｏｍｅ　ｃｅｌｌｓ　ｏｆ　ｇｌｏｍｅｒｕｌｕｓ　ａｎｄ　ｓｐｌａｎｃｈｎｏｄｅｒｍ　ｃｅｌｌｓ　ｏｆ　ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ　ｃａｐｓｕｌｅ．￣４０　维普资讯 http://www.cqvip.com