维普资讯 http://www.cqvip.com 重庆医学２００７年４月第３６卷第８期 ６８９ ・论 著・ 非酒精性脂肪性肝病大鼠肝Ｘ受体０ｔ和固醇调节元件结合 蛋白一１ｃ的表达及意义 艾正琳，陈东风 ，史洪涛，胡 辂，王 军 （第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科，重庆４０００４２） 摘 要：目的 观察肝Ｘ受体ｄ（ＬＸＲ￣）和固醇调节元件结合蛋白一ｌｃ（ＳＲＥＢＰ－ｌｃ）在大鼠非酒精性脂肪性肝病（ＮＡＦＬＤ）中的 表达变化，以探讨二者在ＮＡＦＬＤ形成过程中的作用及可能机制。方法建立高脂饮食诱导ＮＡＦＬＤ大鼠模型后，采用逆转录聚 合酶链反应（ＲＴ—ＲＣＲ）和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法动态观察ＮＡＦＩ Ｄ大鼠肝组织中ＬＸＲｄ和ＳＲＥＢＰ－１ｃ表达变化。结果 与对照组相比， ＮＡＦＬＤ组大鼠肝组织中ＬＸＲｕ和ＳＲＥＢＰ－ｌｃ基因和蛋白表达，从第２周开始增加，１２周时升高最显著（Ｐ＜Ｏ．０１），与脂肪肝进展 程度一致。结论ＬｘＲｄ和ｓＲＥＢｐ－１ｃ的表达变化与ＮＡＦＬＤ的形成密切相关。 关键词：非酒精性脂肪性肝病；肝ｘ受体ａ；固醇调节元件结合蛋白一１ｃ；脂代谢紊乱 中图分类号：Ｒ３６５．５７５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７１—８３４８（２００７）０８—６８９—０３ Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｌｉｖｅｒ Ｘ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａ ａｎｄ ｓｔｅｒｏｌ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｌｅｍｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｌｃ ｉｎ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ｒａｔｓ Ａ Ｉ Ｚｈｅｎｇ—ｌｉｎ，ＣＨＥＮ Ｄｏｎｇ—ｆｅｎｇ，ＳＨＩ Ｈｏｎｇ－ｔａｏ，ｅｔ ａ１． （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｏａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｉｅｌｄ Ｓｕｒｇｅｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｄａｐｉｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ， Ｔｈｉｒｄ Ｍｉｌｉｔａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４０００４２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｌｉｖｅｒ Ｘ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄ（ＬＸＲ￣）ａｎｄ ｓｔｅｒｏｌ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｌｅｍｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｌｃ（ＳＲＥＢＰ—ｌｃ）ｉｎ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ（ＮＡＦＬＤ）ｉｎ ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｗｉｔｈ ｆａｔｔｙ ｄｉｅｔ．Ｔｈｅ ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＬＸＲｄ ａｎｄ ＳＲＥＢＰ—ｌｃ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＲＴ－ＰＣＲ）ａｎｄ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ Ｇｒｏｕｐ Ｃ，ｉｎ Ｇｒｏｕｐ Ｆ，ｔｈｅ ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＬＸＲｄ ａｎｄ ＳＲＥＢＰ－ｌｃ ｉｎ ２ ｗｅｅｋ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ．ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｐｅａｋ ｗａｓ ｒｅａｃｈｅｄ ｉｎ １２ ｗｅｅｋ（Ｐ％０．０１）．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅｍ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅ— ｇｒｅｅ ｏｆ ＮＡＦＬＤ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ Ｉ．ＸＲ￣ａｎｄ ＳＲＥＢＰ—ｌｃ ａｒｅ ｃｌｏｓｅｌｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌ— ｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ；ｌｉｖｅｒ Ｘ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄ；ｓｔｅｒｏｌ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｌｅｍｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ；ｌｉｐｉｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｄｉｓｏｒ— ｄｅｒ 随着生活方式的改变，非酒精性脂肪性肝病（ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ １．２肝组织病理学 留取约ｌｃｍＸ ｌｃｍＸ ｌｃｍ大小肝组织，石 ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ，ＮＡＦＩ Ｄ）已成为许多发达和发展中国家日 蜡切片，常规ＨＥ染色，观察脂肪变程度。病理诊断标准参照 益增多的疾病，在我国的发病率也逐年上升。ＮＡＦＬＤ的发病 非酒精性脂肪肝病诊疗指南（２００６年２月中华医学会肝病学 机制至今尚未阐明，既往研究表明机体脂质代谢紊乱是 分会脂肪肝和酒精性肝病学组制定）的标准 ］。 ＮＡＦＬＤ发生的关键环节之一，而肝脏是机体脂质代谢中心器 １．３ ＲＴ—ＰＣＲ检测ＬＸＲｄ：ＳＲＥＢＰ—ｌｃ的ｍＲＮＡ表达 肝组 官，其脂质代谢的机制十分复杂。近年来研究发现，肝ｘ 织总ＲＮＡ提取和ｃＤＮＡ合成分别采用Ｔｒｉｚｏｌ试剂盒（博大泰 受体ｄ（１ｉｖｅｒ Ｘ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄ，ＬＸＲ￣）、固醇调节元件结合蛋白一１ｃ 克公司），和ＴａＫａＲａ ＰＴ－ＰＣＲ试剂盒（大连宝生物公司），按说 （ｓｔｅｒｏｌ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｌｅｍｅｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＳＲＥＢＰ＿１ｃ）是 明书标准步骤操作。 肝脏脂质代谢的重要核转录因子，是脂肪酸代谢中的关键 引物序列：ＬＸＲｄ上游：５ ｒ＿ＡＣＧ ＡＧＣ ＴＡＴ ＧＣＡ ＧＴＧ 点＿１ ］。本研究采用ＲＴ—ＰＣＲ与Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ动态观察ＬｘＲｄ ＴＡＴ ＧＴＧ ＧＧ－３ ；下游：５，＿ＣＣＴ ＣＴＴ ＣＴＴ ＧＡＴ ＧＣＴ ＴＣＡ 和ＳＲＥＢＰ—ｌｃ在高脂饮食诱导ＮＡＦＬＤ大鼠模型中的基因和 ＧＴＴ ＴＣ一３ ，扩增片段长度２７０ｂｐ。ＳＲＥＢＰ－ｌｃ上游：５ＬＧＣＣ 蛋白表达，进一步探讨ＮＡＦＬＤ形成过程中ＬｘＲｄ、ＳＲＥＢＰ—ｌｃ ＡＴＣ ＧＡＣ ＴＡＣ ＡＴＣ ＣＧＣ ＴＴＣ ＴＴ一３ ；ＳＲＥＢＰ－１ｃ下游：５ 一 的作用和可能机制。 ＴＧＧ ＧＣＴ ＴＴＣ ＡＣＣ ＴＧＧ ＴＴＡ ＴＣＣ ＴＣ－３ ，扩增片段长度 １材料与方法 ３１１ｂｐ。１３－ａｃｔｉｎ上游：５ ＣＴＧ ＡＧＡ ＧＧＧ ＡＡＡ ＴＣＧ ＴＧＣ ＧＴ－ １．１动物分组及模型建立４周龄Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠４８只，体 ３ ；下游：Ｓ ｒ＿ＣＧＧ ＡＣＴ ＣＡＴ ＣＧＴ ＡＣＴ ＣＣＴ ＧＣＴ ＴＧ－３ ，扩增 质量平均约（１９８．６±７．２）ｇ。适应性饲养１周后，随机分为对 片段长度４８６ｂｐ。 照组（Ｃ组，给予基础饲料，由第三军医大学实验动物中心提 ＰＣＲ扩增：９４℃预变性２ｍｉｎ，９４℃变性３０ｓ，５４。Ｃ／５６℃ 供）与ＮＡＦＬＤ组（Ｆ组，给予高脂饲料，由基础饲料８８ ，猪油 （ＬｘＲｄ／ｓＲＥＢＰ＿１ｃ）退火３０ｓ，７２℃延伸４０ｓ，进行３Ｏ个循环，最 １Ｏ ，胆固醇２ 组成），每组又分为２、４、８、１２周４个时相点， 后７２℃再延伸５ｒａｉｎ。经２ 琼脂糖凝胶电泳，利用Ｉｍ— 各时相点随机分配６只动物。 ａｇｅＭａｓｔｅｒ ＶＤＳ—ＣＬ凝胶分析系统对扩增产物条带进行扫描， 通讯作者 维普资讯 http://www.cqvip.com ６９Ｏ 重庆医学２００７年４月第３６卷第８期 表１ ＮＡＦＬＤ大鼠肝组织ＬＸＲａ ｍＲＮＡ 表达ｆ ±Ｓ， 一６） 以ＬＸＲａ或ＳＲＥＢＰ－ｌｃ／ｌ￣－ａｃｔｉｎ的吸光度比值作为ＬＸＲａ或 ＳＲＥＢＰ一１ｃ ｍＲＮＡ表达的相对含量。 １．４ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＬＸＲａ、ＳＲＥＢＰ＿１ｃ蛋白表达 取右叶 肝组织２００ｍｇ加入ＲＩＰＡ裂解液２ｍｌ中，冰浴下匀浆１５～２Ｏ 下／次，匀浆２～３次，至匀浆液均匀无颗粒。将裂解液吸人１．５ ｍｌ ＥＰ管中（０．５ｍｌ／每管），置冰上裂解６０ｍｉｎ。４℃离心， ２６ ０００ｇ，１５ｍｉｎ。取上清，重复离心１次（４℃，２６ ０００ｇ， １５ｍｉｎ）。Ｆｏｌｉｎ法定量后，取５０／１ｇ蛋白，变性，行聚丙酰胺凝胶 电泳，转移至纤维膜，５ 脱脂奶粉室温封闭１ｈ，山羊抗鼠 与对照组比较， Ｐ％０．０１。 ＬＸＲａ抗体１：５００（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ公司）或兔抗鼠ＳＲＥＢＰ－ｌｃ抗体 ｌ：８００（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ公司）浸泡滤膜，４℃过夜，洗涤后加入辣根 Ｂ ｃｔｌｎ（ ６ ⅡＲ ‘２ 过氧化酶结合的抗山羊ＩｇＧ １：５ ０００（北京中杉公司）或抗兔 ＩｇＧ １：５ ０００（北京中杉公司），洗膜后化学发光试剂检测，Ｘ 线片显影。定量分析采用分子生物学图像分析系统测定各目 的条带积分灰度值，所测结果为扣除背景的积分光密度。 Ｉ．５统计学处理 数据分析采用ＳＰＳＳ１０．０软件，计量资料 以 ±Ｓ表示，进行单因素方差分析。Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１差异 均有统计学意义。 ２结 果 ２．１肝组织病理结果 光镜观察发现ｃ组大鼠肝小叶结构 规则，细胞形态正常（图１）。高脂饲养２周后，Ｆ２周组少许肝 细胞胞质疏松并可见脂滴沉积，脂肪变肝细胞数＜５ ，为０度 脂肪肝。Ｆ４周组呈２度脂肪肝，部分胞质疏松呈空泡状，有较 多的脂滴沉积，脂肪变肝细胞数３Ｏ ～５Ｏ 。Ｆ８周组呈３度 脂肪肝，大多数肝细胞内充满脂滴，脂肪变肝细胞数５Ｏ ～ ７５％。Ｆ１２周组时广泛弥漫性肝细胞脂肪变性，胞质内充满大 量脂肪空泡，脂肪变肝细胞数＞７５ ，呈４度脂肪变（图２）。 图１ Ｃ组大鼠肝脏ＨＥ染色（×４００） 图２ Ｆ１２Ｗ组大鼠肝脏ＨＥ染色（×４００） ２．２ ＲＴ—ＰＣＲ检测大鼠肝脏ＬＸＲ 、ＳＲＥＢＰ＿１ｃ ｍＲＮＡ表达变 化Ｆ组从２周开始，大鼠肝组织ＬＸＲａ基因ｍＲＮＡ转录增 多，４、８周转录水平进一步增强，１２周时增高幅度最明显，与ｃ 组相比差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１），Ｃ组各组间差异无统计 学意义（Ｐ＞Ｏ．０５），见表１、图３。 图３ ＮＡＦＬＤ大鼠肝组织ＬＸＲ ｍＲＮＡ ＲＴ—ＰＣＲ 扩增产物电泳结果 ｃ组各组问ＳＲＥＢＰ－１ｃ基因ｍＲＮＡ表达差异无统计学意 义（Ｐ＞Ｏ．０５），而Ｆ组从２周开始ｍＲＮＡ转录增多，随脂肪肝 程度的加重逐渐增加，１２周时增加幅度最明显（Ｐ％０．０１），见 表２、图４。 表２ 大鼠肝组织ＳＲＥＢＰ＿ｌｃ ｍＲＮＡ表达 变化（ ± ， 一６） 与对照组比较， Ｐ＜Ｏ．０１。 ｌ ５帅ｌＩＤ ５。‰ §吨ｃｔｉ¨《镐６ｂＤ） ∞‰ ＳＲＥＢＰ Ｉｃ（３１Ｉ ＴＳ，） Ｍ １＂２搿Ｃ４用 ｃ＃瓣Ｃｌ２褥 Ｍ 搿 ¨搿 Ｆ８瓣 ＦＩ２掏 图４ 大鼠肝组织ＳＲＥＢＰ－ｌｃ ｕｔＲＮＡ ＲＴ—ＰＣＲ 扩增产物电泳结果 ２．３大鼠肝组织ＬＸＲａ、ＳＲＥＢＰ—ｌｃ蛋白表达变化 以Ｃ８周 组代表ｃ组，Ｆ组从２周开始肝组织ＬＸＲａ蛋白（其分子量为 ５０ｋｄ）含量增加，随脂肪肝程度的加重逐渐增多，４、８周表达水 平进一步增强，１２周时最明显，与Ｃ组相比，差异有统计学意 义（Ｐ％Ｏ．０１），见表３、图５ 表３ ＮＡＦＬＤ大鼠肝组织ＬＸＲａ蛋白表达（ ±Ｓ， 一６） ９７．１８±１Ｏ．１４ １２９．７４±１２．１８ａ １５０．３１±２９．４９ａ １６２．２５士２４．８６ａ １８９．１７±３１．４７ａ 与对照组比较， Ｐ％０．０１ ｘＲ“ＯＯｋｄ） ｃ缠Ｆ２ｗ Ｆ４Ｗ Ｆ８Ｗ Ｆ１２Ｗ 图５ ＮＡＦＬＤ大鼠肝组织ＬＸＲａ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ电泳结果 结果显示Ｆ组从２周ＳＲＥＢＰ－Ｉｃ表达开始增强，其蛋白分 维普资讯 http://www.cqvip.com 重庆医学２００７年４月第３６卷第８期 ６９１ 子量为６８ｋｄ，同时以Ｃ８周组代表ｃ组。随时间延长，在４、８ 周表达进一步增加，１２周时增加幅度最明显，与ｃ组相比，差 固醇含量增加，其代谢产物氧化固醇增多，而后者正是ＬＸＲａ 的内源性激动剂ｌ４Ｊ，ＬＸＲａ被激活后可激活靶基因ＳＲＥＢＰ－ｌｃ 异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１），见表４、图６。 表４ 大鼠肝组织ＳＲＥＢＰ一１Ｃ蛋白表达变化（ ±Ｓ， 一６） ９４．１５±ｌ２．５ｏ １６８．５２±１３．５４＂１７６．８６±３０．６５ａ １９２．７４±１２．８４＂２１４．３９±５７．３７ａ 与对照组比较， Ｐ％０．０ｌ。 ＳＲＥＢｐ－１Ｃ（６８ｋｄ） ０组 Ｆ２周 Ｆ４周 Ｆ８周 Ｆ１２周 图６ 大鼠肝组织ＳＲＥＢＰ一１Ｃ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ电泳结果 ３讨 论 ＮＡＦＬＤ是指除外酒精和其他明确的损肝因素所致的以 弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特征的临床病理综合征，包 括单纯性脂肪肝及由其演变的脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）和ＮＡＳＨ 相关性肝硬化３种类型。其发病机制至今尚未明确，目前认为 与脂质代谢异常、氧应激及脂质过氧化反应等因素密切相关。 ＬＸＲａ是一种能被氧化固醇激活的核受体，在脂代谢密切 相关的组织中大量表达，以肝脏中含量最多，它通过调节胆固 醇的输出及脂肪酸的合成等来脂质的动态平衡 ］。 ＳＲＥＢＰ—ｌｃ是一种脂肪合成基因的重要转录调节因子，它通过 调节脂肪代谢相关酶的基因表达来体内的脂肪合成＿５］。 本研究采用ＲＴ－ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法检测ＳＲＥＢＰ－１Ｃ ｍＲＮＡ和蛋白表达，发现在高脂喂养２周后，ＳＲＥＢＰ—ｌｃ表达 在基因和蛋白水平开始增多，但肝组织病理ＨＥ染色未见明显 改变。提示在高脂饮食早期，虽然ＳＲＥＢＰ—ｌｃ在分子水平已有 变化，但机体可能存在一个自我适应的过程，通过自身调节从 而维持脂肪酸代谢平衡，故未发生ＮＡＦＬＤ。 随着时间延长，Ｆ组大鼠４周后ＳＲＥＢＰ－ｌｃ ｍＲＮＡ和蛋白 表达进一步增强，病理学出现脂肪肝的改变。推测可能由于 ＳＲＥＢＰ－ｌｃ表达增强，通过高尔基体上位点１蛋白酶（ＳＩＰ）和 位点２蛋白酶（Ｓ２Ｐ）催化的２步蛋白酶裂解反应，将其氨基末 端ｂＨＬＨ—Ｚｉｐ区域的成熟ＳＲＥＢＰ－ｌｃ释放人核中以激活其靶 基因 ］。ＳＲＥＢＰ－ｌｃ调节的靶基因包括低密度脂蛋白受体、乙 酰辅酶Ａ羧化酶、ＦＡＳ等，它们参与许多脂质代谢的重要生理 过程＿７］。当ＳＲＥＢＰ一１Ｃ的表达增加到一定程度，超过机体的自 我调节及适应能力时，引起其的成脂基因的过度表达，脂 肪酸合成异常增多，肝脏脂质代谢障碍，导致ＮＡＦＬＤ的发生。 同时采用ＲＴ－ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法检测ＬＸＲａ ｍＲＮＡ 及蛋白表达，发现ＬＸＲａ基因和蛋白表达变化与ＳＲＥＢＰ—ｌｃ的 趋势完全相同，推测ＬＸＲａ能激活ＳＲＥＢＰ一１Ｃ的表达。由于 ＳＲＥＢＰ—ｌｃ启动子中包含ＬＸＲ结合位点ｌ８］，当ＬＸＲａ与类似黄 醇ｘ受体（ＲＸＲ）形成ＬＸＲａ／ＲＸＲ异二聚体后，结合到 ＳＲＥＢＰ－ｌｃ启动子上游ＬＸＲ反应元件的顺式元件上，从而 ＳＲＥＢＰ一１Ｃ的转录＿ｇＪ。 随着高脂喂养时间的延长，发现ＬｘＲａ、ＳＲＥＢＰ一１Ｃ表达逐 渐增强，脂肪肝程度不断加重，提示高脂饮食可诱导ＬｘＲａ、 ＳＲＥＢＰ－ｌｃ表达的增强。由于ＬｘＲａ是机体保持胆固醇相对稳 定的关键感受器，可被氧化固醇激活ｌ１ 。高脂状态下血中胆 的表达。随着ＬｘＲａ、ＳＲＥＢＰ一１Ｃ的过度表达，脂肪酸合成异常 增多，导致ＮＡＦＩ Ｄ发生。 综上所述，本实验利用高脂饮食诱导大鼠ＮＡＦＬＤ模型， 以ＬＸＲａ和ＳＲＥＢＰ—ｌｃ为研究对象，结合观察肝组织病理学指 标，结果显示在ＮＡＦＩ Ｄ形成过程中，ＬｘＲａ、ＳＲＥＢＰ一１Ｃ表达明 显增加，与脂肪肝程度密切相关。提示二者在介导脂质代谢紊 乱引起ＮＡＦＬＤ的过程中起着重要作用，但这种作用是否占主 导地位目前还不清楚，尚需进一步研究阐明，但已为进一步研 究ＮＡＦＬＤ发病机制提供了新的认识。 参考文献： ［１］Ｈｏｕｃｋ ＫＡ，Ｂｏｒｃｈｅｒｔ ＫＭ，Ｈｅｐｌｅｒ ＣＤ，ｅｔ ａ１．Ｔ０９０１３１７ ｉｓ ａ ｄｕａｌ ＬＸＲ／ＦＸＲ ａｇｏｎｉｓｔＤ］．Ｍｏｌ Ｇｅｎｅｔ Ｍｅｔａｂ，２００４， ８３（１—２）：１８４ ［２］Ｊｕｍｐ ＢＤ，Ｂｏｔｏｌｉｎ Ｄ，Ｗａｎｇ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｒｅｇｕｌａ— ｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎＶＪ］．Ｊ Ｎｕｔｒ，２００５，１３５ （１１）：２５０３ －Ｉ３］中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组．非 酒精性脂肪性肝病诊疗指南Ｉ－Ｊ］．中华肝脏病杂志，２００６， １４（３）：１６１ ［４］Ｒａｎｔ ＤＢ，Ｒｏｎａｌｄ ＭＥ．ＰＰＡＲｓ ａｎｄ ＬＸＲｓ：ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏ— ｓｉｓ ｇｏｅｓ ｎｕｃｌｅａｒ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ，２００４，１５ （４）：１５８ －Ｉ５］Ｅｄｗａｒｄｓ ＰＡ，Ｔａｂｏｒ Ｄ，Ｋａｓｔ ＨＲ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ＳＲＥＢＰ ａｎｄ ＳＣＡＰ ，ＩＪ］．Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏ— ｐｈｙｓ，２０００，１５２９（卜３）：１０３ １－６］Ｓｅｗｔｅｒ Ｃ，Ｂｅｒｇｅｒ Ｄ．Ｈｕｍａｎ ｏｂｅｓｉｔｙ ａｎｄ ｔｙｐｅ ２ ｄｉａｂｅｔｅｓ ａｒｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ＳＲＥＢＰ１ ｉｓｏｆｏｒｍ ｅｘｐｒｅｓ— ｓｉｏｎ ｔｈａｔ ａｒｅ ｒｅｐｔｏｄｕｃｅｄ ｅｘ ｖｉｖｏ ｂｙ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－ ａｌｐｈａｌ，Ｊ］．Ｄｉａｂｅｔｅｓ，２００２，５１（４）：１０３５ Ｉ－ｒ］艾正琳，陈东风．ＳＲＥＢＰ一１Ｃ在大鼠非酒精性脂肪性肝病 中的表达及意义Ｉ－Ｊ］．第三军医大学学报，２００６，２８（１０）： １０６３ Ｉ－８］Ｂｏｂａｒｄ Ａ，Ｈａｉｎａｕｌｔ Ｉ，Ｆｅｒｒｅ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｆｆｅｒａｎｔｉａｌ ｒｅｇｕｌａ— ｔｉｏｎ ｏｆ ＳＲＥＢＰ一１ Ｃ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ｉｎｓｕｌｉｎ ａｎｄ ＬＸＲ ｄｕｒｉｎｇ ｌｉｖｅｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ－ｌＪ］．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２００５，２８０ （１）：１９９ １－９］Ｌａｒｔｅｒ ＣＺ，Ｆａｒｒｅｌｌ ＧＣ．Ｉｎｓｕｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎ， ｃｙｔｏｋｉｎａｓｅ ｉｎ ＮＡＳＨ：ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｔａｒｇｅｔ ｏｆ ｔｒｅａｔ Ｉ－Ｊ］．Ｊ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，２００６，４４（２）：２５３ １－１０］Ａｂｉｌｄａｙｅｖａ Ｋ，Ｊａｎｓｅｎ ＰＪ，Ｈｉｒｓｃｈ—Ｒｅｉｎｓｈａｇｅｎ Ｖ．２４（Ｓ）一 ｈｙｄｒｏｘｙｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｓ ｉｎ ａ ｌｉｖｅｒ Ｘ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｃｏｎ— ｔｒｏｌｌｅｄ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ ｔｈａｔ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏ— ｔｅｉｎ Ｅ—ｍｅｄｉａｔｅｄ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｅｆｆｌｕｘｌ，Ｊ］．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２００６， ２８１（１８）：１２７９９ （收稿日期：２００６ １２ １２）
